富甘氨酸果蝇抗菌肽SK66的抗菌机制研究

冯志国　刘慧娟　李涛　陈正望

摘要：为了研究ＳＫ６６的抗菌机制，对Ｋ６６－ｈｉｓ、ＡＭＡ－ＳＫ６６、Ｔｒｘ－ＳＫ６６进行序列比对和分析，结果发现Ｔｒｘ－ＳＫ６６是ＳＫ６６的氮端加了１个Ｔｒｘ蛋白，ＡＭＡ－ＳＫ６６是ＳＫ６６的氮端加了２个丙氨酸和１个甲硫氨酸，ＳＫ６６－ｈｉｓ是在ＳＫ６６的碳端加了６个组氨酸；比较ＳＫ６６－ｈｉｓ、ＡＭＡ－ＳＫ６６和Ｔｒｘ－ＳＫ６６杀灭细菌活性，结果表明Ｔｒｘ－ＳＫ６６没有杀菌活性，ＡＭＡ－ＳＫ６６杀菌活性大大降低。试验结果说明氮端氨基酸对ＳＫ６６杀菌活性很重要，尤其氮端氨基酸的极性。

关键词：抗菌肽ＳＫ６６；果蝇；富甘氨酸抗菌肽；抗菌机制

中图分类号：Ｑ７８ 文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８114（２０12）24－5662-03

昆虫不具备特异性免疫系统，其利用自身产生的各种昆虫抗菌肽来应对损伤和感染［１］。昆虫抗菌肽种类繁多，不同抗菌肽的作用机制不同。根据抗菌肽作用于细胞部位的不同，可以将其大体分为两类，一类是直接作用于微生物细胞膜的杀伤模式，抗菌肽首先通过静电结合被吸引到细胞表面，到达质膜后与脂质双分子层相互作用。目前已提出桶－板模型［１］、毯式模型［２］、环形孔模型［３］等多种模式来解释抗菌肽的膜穿透活性。另一类为作用于靶点的细胞内杀伤模式。抗菌肽被转入胞浆，能够通过改变质膜隔膜形成、抑制细胞壁合成、抑制核酸合成、抑制蛋白质合成或抑制酶活性以达到杀菌的目的［４］。

富含甘氨酸（Ｇｌｙ）的抗菌肽的共同特点是一级结构中含甘氨酸，有些是全序中富含甘氨酸［５］，如鞘翅肽（Ｃｏｌｅｏｐｔｅｒｉｃｉｎ）、半翅肽（Ｈｅｍｉｐｔｅｒｉｃｉｎ），有些是某一结构域中富含甘氨酸［６］，如双翅肽（Ｄｉｐｔｅｒｉｃｉｎ）、麻蝇毒素Ⅱ（ＳａｒｃｏｔｏｘｉｎⅡ）、凝集素（Ａｔｔａｃｉｎ）等，都至少有１个富含甘氨酸的结构域。果蝇抗菌肽ＳＫ６６结构域中富含甘氨酸［７－１０］，试验通过对ＳＫ６６－ｈｉｓ、ＡＭＡ－ＳＫ６６和Ｔｒｘ－ＳＫ６６的杀菌活性比较，试图为富甘氨酸抗菌肽ＳＫ６６的抗菌机制研究提供基础资料。……