高浓度甲状腺素对软骨细胞聚集体（pellets）体外形成软骨组织的作用

刘瑾春等

[摘要]目的：药物浓度（100nM）甲状腺素对组织工程软骨形成的作用。方法：将软骨细胞聚集体分为常规培养组（DMED+10%FBS）和100nM甲状腺素组（DMED+10% FBS +100nM甲状腺素），体外培养1、2和3周取材进行大体形态、组织学、二型胶原和十型胶原免疫组化染色和软骨特异基因PCR分析。结果：100nM甲状腺素组形成的软骨细胞聚集体的体积和湿重均明显低于常规培养组，甲苯胺兰、二型胶原（ColⅡ）染色较常规培养组弱，软骨细胞特异基因的表达水平与常规培养组相似，软骨细胞肥大相关基因十型胶原（ColⅩ）及基质金属蛋白酶13（MMP13）的表达较对照组减弱，成骨方向分化相关基因（ColⅠ，Runx2）的表达与常规培养组相似。结论：高浓度甲状腺素能够抑制软骨细胞肥大，但同时也抑制了软骨细胞增殖和软骨细胞基质分泌。

[关键词]甲状腺素；软骨组织工程；软骨细胞；细胞外基质；细胞聚集体

[中图分类号]Q813.1[文献标识码][文章编号]1008-6455（2012）08-1324-04

软骨组织工程为软骨缺损修复提供了一种新的治疗方法[1]。软骨细胞是软骨组织工程种子细胞的一个重要来源，目前应用软骨细胞为种子细胞在体内外已经能够成功构建出精确形状的成熟软骨组织[2-3]。但是体外构建的组织工程软骨的生化和力学质量与生理软骨仍具有一定的差距[4]。在目前软骨细胞常规培养方案（主要为DMEM添加10%胎牛血清）基础上寻找新的优化成分是软骨组织工程的课题之一。

1材料和方法

1.3 软骨细胞pellets培养：第二代软骨细胞（P2）聚集体（pellets）根据培养基的不同分为2组，常规组培养基：低糖DMEM，10%胎牛血清，1%青霉素和链霉素。……