海藻酸钠固定化脂肪酶的制备及性质研究

金红娣 王巧映 余凯 董华平

摘 要:本文采用海藻酸钠包埋法得到了固定化脂肪酶。通过条件优化得到了最佳固定化条件:海藻酸钠浓度1.5%,CaCl2浓度3%,固定化时间为1h。该固定化脂肪酶连续反应4批之后,酶活保持稳定,显示了较好的催化稳定性。

关键词:海藻酸钠脂肪酶固定化催化稳定性

中图分类号:TQ 文献标识码:A 文章编号:1674-098X(2012)05(b)-0142-01

脂肪酶(Lipase,EC3.1.1.3),又称甘油三酯水解酶,是一类能催化长链脂肪酸甘油酯水解为甘油和长链脂肪酸的酶类,许多脂肪酶还能催化酯化反应酯交换反应、醇解反应、酸解反应以及氨解反应等。目前,脂肪酶已广泛应用于食品、医药、皮革、日用化工等行业。但游离脂肪酶稳定性差、容易失活、难以回收利用等缺点,限制了其在工业生产中的应用。通过固定化技术,将脂肪酶固定化在一定的载体上可以提高活力和稳定性,而且易于回收重复使用,因此酶固定化技术被广泛地应用,以降低生产成本、提高生产效率[1～2]。海藻酸钠作为一种生物相容性较好、机械强度较高、对酶蛋白无毒副作用的高分子载体,经常用于酶催化剂的固定化[3～4]。

本文以海藻酸钠作为载体,制备固定化脂肪酶,并对固定化条件和酶学性质作了详细的研究。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

恒流泵(苏州江东精密仪器有限公司,BT-100B),恒温水浴振荡器(太仓市实验设备厂,SHZ-88A),多能搅拌器(金坛市白塔金昌实验仪器厂,HJ-5),分析天平(AB204-N)。

海藻酸钠(生物级,阿拉丁试剂(上海)有限公司),牛胰脂肪酶(13-35units/mg),橄榄油(分析纯,阿拉丁试剂(上海)有限公司),聚乙烯醇(分析纯,阿拉丁试剂(上海)有限公司),其余试剂均为分析纯。……