两个海洋环肽Galaxamide类似物的合成及抗肿瘤活性研究

陈 萌，曲 桐，徐石海

(暨南大学生命科学技术学院化学系，广东 广州 510632)

环肽类化合物是海洋生物次生代谢的产物，不仅具有多样及独特的化学结构，而且具有抗菌、抗病毒、抗癌、抗炎和免疫抑制等多种生物活性。Galaxamide是从中国南海西沙群岛的海藻中分离得到的一个新型环五肽环(亮氨酰-N-甲基亮氨酰-亮氨酰-N-甲基亮氨酰-亮氨酰)，体外抗肿瘤实验表明该化合物对人体肾癌细胞(GRC-1)、人肝癌细胞(HepG2)有较好的细胞毒性(IC50分别为4.26 μg·mL-1、4.63 μg·mL-1)[1]。由于环肽的环状结构及其特殊的构象约束作用[2],与线性肽相比,稳定性更好,抗酶解能力更强。正是由于环肽独特的空间三维结构,其对于研究药物作用机理及开发新药都有着重要作用[3]。为了进一步探讨构效关系(SAR),作者在前人研究的基础上[4]采用经典的“3+2”全合成方法，同时改变原料亮氨酸构型和环肽的N-甲基的数量,设计合成了两个Galaxamide类似物(图1)，对其结构进行了表征，并研究了其体外抗肿瘤活性。Galaxamide类似物的合成路线见图2。

图1 Galaxamide类似物的结构式

图2 Galaxamide类似物的合成路线

1 实验

1.1 试剂与仪器

试剂均为市售AR或CP，未进一步纯化。

1200型高效液相色谱仪，Agilent公司;4000 Q TRAP型质谱仪，美国应用生物系统公司；INOVA 500 MHz型核磁共振仪，美国Varian公司；R-210BUCHI型旋转蒸发仪，瑞士Buchi公司；柱层析硅胶(200～300 目)，青岛海洋化工厂。

产物纯度由HPLC 检测分析。色谱条件：C18柱(4.6 mm×100 mm，220 nm)，流动相70％～100％ CH3OH/0.1％ TFA，流速1 mL·min-1，梯度洗脱。

1.2 合成

1.2.1 Boc-Leu(a1)的合成

向250 mL的圆底烧瓶中连续加入THF(56 mL)、H2O(42 mL)和NaOH(1 mol·L-1，42 mL)溶液，冰浴冷却下一次性加入L-Leu(2.62 g，20 mmol)，搅拌10 min使L-Leu溶解，然后一次性加入Boc2O(5.24 g，24 mmol)，冰浴下继续搅拌10 min，然后缓慢升至室温并调pH值为10～11，搅拌过夜。……