体外连续传代培养对生物工程细胞CHO凋亡的影响

高 茜,管 莹,曾婉俐,朱洲海,李雪梅,缪明明,夭建华

(云南烟草科学研究院,云南 昆明 650106)

中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary，CHO)细胞由于生长快、易培养，被广泛应用于生物工程和化学物质的毒理学评价。全球至少70％的药物蛋白来源于CHO细胞系，用CHO细胞生产的生物制品每年超过300万美元[1]。国内外很多组织与机构都采用CHO细胞系来评价化学品或食品添加剂的毒性：OECD化学物质试验指南中推荐采用CHO细胞作为哺乳动物基因突变检测的细胞系[2]，FAO/WHO食品添加剂联合专家委员会(JECFA)使用CHO细胞系来评价食品添加剂的安全性[3]，加拿大卫生部和雷诺公司采用CHO细胞系用来评价卷烟烟气的细胞毒性[4]。

细胞长期的连续传代培养会对其结构与功能特性造成影响，最终导致基因工程蛋白产量的降低以及检测结果的不稳定。有报道指出，细胞培养时间的延长将增加培养体系中诱导细胞凋亡的环境压力，触发细胞凋亡[5]。细胞凋亡是指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡；而细胞坏死是细胞受到强烈理化或生物因素作用引起细胞无序变化的死亡。作为一个程序性细胞死亡的模式，细胞凋亡是一个对于外部信号或者内部压力的有效的控制和监管机制。虽然对于动物细胞在生物反应器中大规模培养的细胞凋亡有所报道[6]，但是对于其体外连续传代培养的凋亡状况却少有研究。因此，作者在此对CHO细胞进行了连续传代培养，并对其凋亡情况进行了研究，以期为CHO细胞的蛋白生产及化学品的毒理学评价提供依据。……