珍稀濒危植物裸果木RAPD反应体系优化研究

王 静，王海芳，花立民，马喜迎，王亮亮

（1.兰州职业技术学院，甘肃 兰州 730070；2.甘肃农业大学 草业学院，甘肃 兰州 730070；3.甘肃省小陇山林业实验局，甘肃 天水 741020）

裸果木（Gymnocarpos przewalskii）隶属石竹科（Caryophyllaceae）裸果木属（Gymnocarpos），主要分布在新疆南部山区、甘肃河西走廊、青海西部、内蒙古西部、宁夏东南部（沙坡头地区）［1］。裸果木是古地中海荒漠残遗种，属于珍稀植物，为1987年我国首批公布的国家二级保护植物，1997年被定为一级保护植物。对研究我国西北和内蒙古荒漠的发生、发展、气候变化及旱生植物区系成分的起源有着非常重要的科学价值［2］。近年来，由于生存环境的恶化，及自身生物学因素，又遭樵采和骆驼啃食等人类各种经济活动的干扰和破坏，裸果木的种群数量急剧减少，分布区已日益缩小和片段化［3］。开展种群遗传学研究，制定相关的保护计划，是保护其的有效途径。

目前有关裸果木的相关研究主要集中在形态解剖学［4，5］、生理生态［6－8］、组织培养和扩繁［9］以及化学成分研究［10］等方面，有关分子水平的研究较少。随机扩增多态性DNA（RAPD）技术是以PCR为基础的一种分子标记，具有操作简便、快速、低成本、多态性检出率高等优点［11］，在遗传多样性评价、物种分类与鉴定、遗传图谱构建等方面有广泛的应用［12，13］，由于RAPD引物的随机性及较低的退火温度等导致的条件不稳定等，影响了该技术的应用。在应用该技术时，通常需要对其反应体系进行优化，以提高其稳定性。为此进行了裸果木RAPD体系的构建和优化试验，为开展裸果木种质资源保护和管理提供有价值的科学参考。……