代文博,米小轶,林红,刘楠
(1. 沈阳市第一人民医院病理科,辽宁 沈阳 110041;2. 中国医科大学病理学教研室)
肿瘤坏死因子受体相关因子(tumor necrosis factor receptor-associated factor,TRAF)是细胞内重要的信号传导蛋白,它可与多种肿瘤坏死因子受体和IL-1R/TLR家族成员结合,参与调节NF-κB和JNK等多种信号转导通路的激活,具有调节正常细胞和肿瘤细胞的增殖、存活、凋亡、参与炎症反应等多种功能[1]。TRAF1是TRAF家族成员中的一个分子,有研究表明TRAF1在鼻咽癌和淋巴瘤组织中表达升高[2-3],但其在乳腺癌中的表达及意义尚不清楚。本实验主要应用免疫组化和Western blot方法研究TRAF1在乳腺癌组织和细胞中表达的变化情况,并分析其与微血管密度之间的关系。
1.1 标本来源 70例乳腺癌组织包括35例非浸润性导管癌(导管原位癌)和35例浸润性导管癌来自中国医科大学附属第一医院手术切除存档蜡块。患者均为女性,中位年龄51岁(28~70岁)。对照标本为癌旁非癌乳腺组织,经病理确认为正常乳腺组织共14例。
人雌激素依赖性受体乳腺癌细胞系MCF-7(低侵袭)和人雌激素非依赖性受体乳腺癌细胞系MDA-MB-231(高侵袭)购于中科院上海细胞库。
1.2 主要试剂 TRAF1鼠抗人单克隆抗体购自美国Santa Cruz公司。CD34鼠抗人单克隆抗体购自美国DACO公司。S-P超敏试剂盒和DAB酶底物显色试剂盒购自福州迈新生物技术开发公司。辣根酶标记第二抗体购自北京中杉金桥生物技术有限公司。DMEM低糖和RPMI 1640培养液、胎牛血清、胰酶购于GIBCO公司。
1.3 方法
1.3.1 免疫组化染色 采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法。……