色素上皮衍生因子的表达与早期糖尿病大鼠视网膜血管形态学的改变△

刘宁宁 才 娜 陈 蕾

糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy，DR)在糖尿病患者中是常见的微血管并发症，而且在发达国家也是最常见的致盲原因。临床流行病学统计DR的发病率高达38% ～90%［1］。新生血管形成是DR主要的病理性改变，并且是其致盲的主要原因。而糖尿病导致 DR发病的机制十分复杂，目前尚未完全明了。研究发现新生血管形成因子与抑制因子之间的平衡失调是新生血管形成的重要机制，抑制血管增生已经成为治疗这类疾病的新靶点［2］。色素上皮细胞衍生因子(pigment epithelium derived factor，PEDF)是目前最有效的血管增生抑制剂之一［3］。本文利用链脲佐菌素(streptozotocin，STZ)诱导糖尿病大鼠模型，用视网膜消化铺片法观察微血管变化，原位杂交技术检测PEDF mRNA在大鼠模型中的动态表达，探讨PEDF在新生血管形成中的作用及其与血管本身器质性改变的关系。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组 12周龄健康Wistar大鼠48只(96眼)，雌雄不限(中国医科大学实验动物中心提供)，体质量180～220 g。随机分成糖尿病1个月组(DM1)、3个月组(DM3)、6个月组(DM6)，正常对照1个月组(CON1)、3个月组(CON3)、6个月组(CON6)，每组各8只大鼠。实验动物饲养于该中心的标准化饲养房，并饲以标准颗粒饲料。铁笼喂养，不限制食水，自然昼夜光线照明。室内通风良好。相对湿度为40% ～70%，室温保持在18～20℃。

1.2 STZ诱导糖尿病大鼠模型 按60 mg·kg-1的剂量对糖尿病各组大鼠行一次性腹腔注射STZ(美国Sigma 公司产品，临用前用0.1 mol·L-1、pH 值4.2 的柠檬酸缓冲液溶解，配制成20 g·L-1STZ溶液)，注射后1周检测定性尿糖和血糖。尿糖在+++以上、血糖＞16.7 mmol·L-1者为糖尿病大鼠。成模后每周测定一次定性尿糖，每个月测定一次血糖。……