林麝肺源致病性大肠杆菌分离鉴定及毒力基因PCR检测

罗 燕，王 朋，赵洪明，冯亚文，武革利，程建国，邹立扣，康纪平，马炳存，李 蓓

(1.四川农业大学都江堰校区微生物学实验室，四川 都江堰 611830；2.石家庄市动物疫病预防控制中心，河北 石家庄 050000；3.河北省兽药监察所，河北 石家庄 050000；4.四川养麝研究所，四川 都江堰 611830)

林麝为国家一级保护动物，其麝香为传统的名贵中药材和高级动物香料，具有重要的经济价值[1]。自1953年以来，我国开展了人工养麝保护及利用麝资源的研究，尽管人工养麝取得了一定的进展，但仍然没有形成规模化养殖，其中一个很重要的因素是受到林麝肺炎的制约。大肠杆菌(E.coli)是引起林麝肺炎的致病原之一[2-3]。目前，对该病原的检测和鉴定仍然为传统检测方法，尚未有林麝致病性E.coli16S rRNA分子鉴定的报道。

E.coli一般分为共生性非致病E.coli，肠道致病性E.coli和肠外致病性E.coli3大类。目前致病性E.coli研究较多的为肠外致病性E.coli[4]。致病性E.coli之间存在较大的基因差异性，其中包括许多毒力基因编码的毒力因子，如：粘附素类、毒素类、摄铁因子类、血清抗性、侵袭类及其他毒力因子[5]。目前尚未见林麝肺源致病性E.coli(Lung pathogenicE.coli，LPEC)毒力因子的研究报道。

本研究通过传统方法和16S rRNA分子鉴定方法从患严重肺炎的林麝肺组织病料中分离到30株E.coli分离株，而且属于致病性E.coli，并对其粘附素类(afa/draB、iha、sfa/focCD)、铁转运系统类(sitD ep.a、sitD chr.、iucDa)、血清类(neuC、ompA)和毒素类(sat、vat)4大类毒力基因进行了检测，鉴定结果显示这些E.coli分离株属于LPEC。该研究为林麝E.coli的致病机理研究及其疾病防治奠定基础。

1 材料和方法

1.1 病 料 从四川省都江堰市白沙养麝场和马尔康养麝场采集的94份患肺炎的林麝病料。……