猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5和M基因重组腺病毒的构建及表达＊

高 博，马 玲，张 念，3，毛 燕，陈凤莲，张守峰，刘 烨，张 菲，扈荣良，吴健敏＊

（1.广西兽医研究所广西畜禽疫苗重点实验室，广西南宁 530001；2.军事医学科学院军事兽医研究所，吉林长春 130122；3.吉林大学畜牧兽医学院，吉林长春 130062）

猪繁殖与呼吸综合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）引起的怀孕猪流产及仔猪呼吸道症状为主要特征，并造成世界养猪业巨大经济损失的一种免疫抑制性疾病［1－2］。PRRSV属于动脉炎病毒科、动脉炎病毒属成员［3］。基因组为单股正链RNA病毒，包含8个～9个开放阅读框，其中ORF1a和ORF1b编码病毒的非结构蛋白，ORF2～ORF7编码结构蛋白，GP2～GP5为糖基化蛋白，N蛋白为核蛋白，M 蛋白为基质蛋白［4－6］。由ORF5编码的GP5蛋白可以诱导机体产生中和抗体，是最主要的保护性抗原；由ORF6编码的M蛋白是PRRSV结构蛋白中最保守的蛋白，具有很强的免疫原性，与细胞免疫有关［7］，且研究表明 M蛋白可以对GP5蛋白产生协同作用，使其产生的抗体水平更高。基于此，本研究将GP5和M基因作为构建重组活载体疫苗的候选基因。

1953年，Rowe W P等［8］在用扁桃体组织块培养物分离“感冒病毒”过程中发现了一种未知病毒。第2年，Hilleman M R等［9］从急性呼吸道患者分离出类似的病毒。1956年，Enders J F等［10］根据病毒经常存在于腺体，且第1次就是从腺体组织中分离获得的事实，建议将这类病毒称为“腺病毒”。此后，相继由人、猴、猪、马、牛、羊、犬、小鼠和鸡等分离出100多个血清型的腺病毒［11］。腺病毒可感染分裂细胞和非分裂细胞，转导细胞种类多，如肺细胞、肝细胞、骨细胞、肌肉细胞、脑细胞等。其感染细胞滴度和外源基因的表达水平较高，因此腺病毒同疱疹病毒、逆转录病毒、痘病毒一样是目前最为广泛使用的病毒载体。……