刘春灵 宋文刚 李惠翔
肺癌是严重危害人类健康的常见恶性肿瘤之一,有关肺癌的发病机制目前尚未彻底阐明,但已经逐步认识到肺癌的发生是涉及多基因、多步骤的互相协同、互相作用的癌变过程。癌基因的异常激活和过度表达在肺癌发生发展中的作用越来越受到人们的重视。
Bmi-1(B-cell specific moloney leukemia virus inserti on site 1, Bmi-1)是PCG (polycomb of genes)成员,其最初发现是作为一种原癌基因,与另一种癌基因c-myc协同作用引起细胞转化和肿瘤形成,导致转基因鼠B细胞淋巴瘤的发病[1]。研究发现,Bmi-1在多种恶性肿瘤组织中呈现过表达[2-4],被认为是一种癌基因。目前国内鲜见Bmi-1与非小细胞肺癌(non-smallcell lung cancer,NSCLC)相关性的报道。本文对42例非小细胞肺癌及其癌旁正常肺组织标本中Bmi-1的表达情况进行了初步的研究和分析,以探讨Bmi-1在NSCLC进展中的作用及其潜在的临床应用价值。
收集漯河市中心医院2007~2010年手术切除的非小细胞肺癌石蜡标本42例。其中男性29例,女性13例,平均年龄59.4岁;病理诊断为鳞癌26例,腺癌16例;中、高分化29例,低分化13例;TNM分期Ⅰ~Ⅱ期27例,Ⅲ~Ⅳ期15例。术前未放疗或化疗。所有标本均经10%中性甲醛溶液固定,石蜡包埋。
每个蜡块4μm厚连续切片进行免疫组化染色。鼠抗Bmi-1单克隆抗体,SP免疫组化试剂盒购自北京中杉公司。PBS代替一抗做阴性对照。
(1)石蜡包埋组织切片,脱蜡水化,磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗5min×3次;(2)将切片置于新鲜配制的3%H2O2中浸泡30min,PBS洗5min×3次;(3)抗原修复。高压锅加热,加热至喷气时开始计时,2min后端离热源,冷却至室温,PBS洗5min×3次;……