人参皂苷Rb1减轻糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤期间心肌细胞凋亡的机制*

刘川鄂 吴述轩 叶 刚

（湖北省恩施土家族苗族自治州中心医院，湖北 恩施 445000）

糖尿病患者围术期并发症和死亡率高于非糖尿病患者［1］，与其病理生理机制有关：糖尿病伴随的逐渐加剧的氧化应激损伤、糖尿病状态下高血糖与蛋白质形成的糖基化终末产物、增强多元醇路径导致超氧阴离子（O2-）自由基的生成、PI3K活性降低等有关［2-3］。已有研究表明，人参皂苷Rb1做为参附注射液的主要有效成分，可以减轻糖尿病心肌缺血再灌注损伤［4］，但对心肌细胞凋亡的影响及机制未明。本研究通过观察人参皂苷Rb1预处理对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注后心肌梗死面积、心肌细胞凋亡及心肌磷酸化Akt（p-Akt）表达的影响，探讨其减轻糖尿病大鼠心肌缺血再灌注期间心肌细胞凋亡的可能机制。

1 材料与方法

1.1 动物 雄性SD大鼠40只，体质量250～300 g，购自华中科技大学同济医学院实验动物中心，许可证号：SCXK（鄂）2004-0007。

1.2 试药与仪器 药品：人参皂苷Rb1（中国药品生物制品检定所）；Wortmaninn（Sigma 公司）；细胞凋亡试剂盒（Roche 公司）；2，3，5-三苯基氯化四氮唑（TTC）（Sigma 公司）；兔抗鼠 Akt多克隆抗体（Cellsignaling Technology）。仪器：DW-2000型动物呼吸机 （上海嘉鹏科技有限公司）；Olympus BX50显微摄影系统（Olympus公司）；恒温摇床 （成都仪器厂）；-80℃深低温冰箱（SANYO 公司）；V30扫描仪（Epson公司）

1.3 模型制备 大鼠禁食12 h，腹腔注射链脲佐菌素（STZ）65 mg/kg，72 h后测定空腹血糖，连续8周空腹血糖＞16.7 mmol/L，并出现多饮、多食、多尿症状，即为1型糖尿病模型制备成功。此后每2周测定1次空腹4 h血糖和体质量，糖尿病大鼠自由饮水，普食饲养8周后制备心肌缺血/再灌注模型。大鼠腹腔注射巴比妥钠（50 mg/kg）后实行气管切开，机械通气。……