张新春 黄 燕
(广东省中医院,广东 广州 510120)
在脑缺血性损伤机制中,自由基连锁反应被认为是造成脑组织损害的重要机制之一,缺血后再灌注可促发自由基的连锁反应,加重缺血性损伤,造成严重的神经元坏死[1]。抑制自由基的产生及自由基清除对缺血再灌注损伤具有保护作用。本实验应用益气活血中药(芎芪合剂)对脑缺血-再灌注损伤大鼠模型进行干预,从其对大鼠缺血脑组织中氧自由基损伤相关指标的影响来探讨芎芪合剂的作用机制。
1.1 动物 SPF级成年雄性SD大鼠30只,体质量250~300 g,由广州中医药大学实验动物中心提供。
1.2 仪器与试剂 包括眼科剪、组织剪、玻璃分针、钢尺、刀柄、刀片、眼科镊(弯)、无齿镊、持针器、小角针、手术线、无菌弯盘、纱布、棉球、渔线、酒精灯、手术台、手术灯等。超氧化物岐化酶(SOD)试剂盒、丙二醛(MDA)试剂盒,均由南京建成生物工程研究所提供。
1.3 药物 芎芪合剂,规格为 10 mL/支,呈棕黄色,澄清透明,由黄芪总皂苷 1.0 g、芍药总苷 0.90 g、磷酸川芎嗪 0.10 g 溶于9 mL注射用水,以1%NaOH调节pH至8,定容至10 mL得浓缩药液,相当于生药:蒙古黄芪50 g,赤芍 30 g,川芎10 g,由广东省中医院制剂室提供。
1.4 模型制备 参照Koizumi[2]方法制成大鼠大脑中动脉缺血-再灌注模型。术后2 h观察大鼠的症状和体征,参照Zealonga评定神经功能缺损程度的5级4分法标准[3],0分为无神经功能缺损症状;1分为轻微神经功能缺损,不能完全伸展左侧前爪;2分为中度局灶性神经功能缺损,向左侧转圈;3分为重度局灶性神经功能缺损,向左侧倾倒;……