烟雾凝聚物对人正常支气管上皮细胞中p16转录的抑制作用及其机制

赵艳红，施新革，吴军兵，王春仁

（1.中国食品药品检定研究院医疗器械检定所生物材料和组织工程室，北京 100050；2.国家食品药品监督管理局医疗器械技术审评中心，北京 100044；3.新乡医学院第一附属医院骨科，河南 卫辉 453100；4.中国科学院生物物理学研究所，北京 100101）

烟雾凝聚物对人正常支气管上皮细胞中p16转录的抑制作用及其机制

赵艳红1，2，施新革3，吴军兵4，王春仁1

（1.中国食品药品检定研究院医疗器械检定所生物材料和组织工程室，北京 100050；2.国家食品药品监督管理局医疗器械技术审评中心，北京 100044；3.新乡医学院第一附属医院骨科，河南 卫辉 453100；4.中国科学院生物物理学研究所，北京 100101）

目的：通过体外模拟吸烟过程来检测抑癌基因p16表达的变化，探讨p16基因在吸烟导致肺癌发生过程中的作用。方法：常规正常支气管上皮细胞（HBE）分为实验组和对照组，分别接受烟雾凝聚物和DMSO处理。利用免疫印迹和Realtime RT－PCR分别检测P16蛋白表达和mRNA的转录水平。构建p16的基因组启动子载体，利用荧光素酶分析烟雾凝聚物对其转录活性的影响。结果：不同浓度（0，10，25，50，100mg·L－1）的烟雾凝聚物处理HBE后，其p16的mRNA和P16蛋白表达水平明显降低，并且表现出剂量依赖性。大于25mg·L－1的烟雾凝聚物能明显抑制P16蛋白表达和mRNA的转录水平，与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05），其中100mg·L－1烟雾凝聚物表现出最大的抑制效应。烟雾凝聚物也能以剂量依赖方式抑制p16启动子的转录活性，大于25mg·L－1的烟雾凝聚物能显著抑制p16启动子的荧光素酶活性，与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05），其中100mg·L－1的烟雾凝聚物表现出最大的抑制效应。……