流式细胞药敏试验在肺癌化疗中的应用

江永青，胡志坚，卢 敏，韩 峰，荀春华

(九江学院附属医院，江西 九江 332000)

全世界每年有超过100万人死于肺癌，国内肺癌的发病率和死亡率占城市恶性肿瘤的首位。合理化疗是有效抑制肿瘤发展，提高患者生命质量、延长生存期的重要途径。然而，目前肿瘤药物敏感实验常用MTT 法，此方法持续时间长、干扰因素多、且难以量化，以至医生难以及时准确用药。此外，目前药敏标本常来源于手术切除物，但大多肺癌患者就诊时已错过最佳手术期。为此我们采试用快速、准确的流式细胞术对纤支镜标本进行肿瘤药敏试验，为临床医生根据个体差异选择治疗方案提供参考。

1 材料与方法

1.1 临床资料 收集2010-2011年在本院住院的患者92例，其中男61例，女31例，年龄46-78岁，经病理及影像学检查证实为非小细胞肺癌者。根据患者用药情况，将其分成两组：实验组48例(经药敏实验指导给药)和对照组44例(根据医生经验给药)，两组的病情、性别、年龄、饮食习惯、职业及文化程度均无显著性差异。

1.2 方法 标本在取出后，应用机械法将其分离成单细胞悬液，用不连续密度梯度离心法纯化细胞，应用流式细胞仪的凋亡检测技术检测活细胞数>90%。细胞重悬于10%胎牛血清的RPMI 1640 培养液(含10%胎牛血清，100 IU／ml 青霉素及链霉素)，将细胞浓度调至1×105个/ml，接种24 孔板，每孔300μl细胞悬液，每种药物及组合设5个平行复孔。根据血药浓度将化疗药物分别加入各孔，分别长春瑞滨(NVB，2.40μg/ml),紫杉醇(PTX,3.60μg/ml),多西紫杉醇(DT,5.00μg/ml),吉西他滨(GEM,46.00μg/ml)，顺铂(CDDP,400.00μg/ml)，卡铂(CBP,100.00μg/ml)，依托泊苷(VP-16,9.40μg/ml),长春瑞滨 (2.40μg/ml)+顺铂 (400.00μg/ml),依托泊苷(9.40μg/ml)+顺铂(400.00μg/ml),吉西他滨(46.00μg/ml)+顺铂 (400.00μg/ml)。加……