越橘查耳酮合酶基因的克隆及表达分析1)

李晓艳 裴嘉博 张志东 吴 林 刘海广 李亚东

(吉林农业大学，长春，130118)

李海燕

(教育部生物反应器与药物开发工程研究中心(吉林农业大学))

花色素苷和类黄酮化合物广泛存在于高等植物中，是植物花和果实等几乎所有色泽形成的物质基础，并起到保护植物免受紫外线和病原体损伤的功能［1］。查耳酮合酶(CHS，EC2.3.1.74)是类黄酮生物合成途径的第一个关键酶，它催化1分子4－香豆酰CoA与3分子丙二酰CoA缩合形成含15个碳原子的查耳酮，为类黄酮提供了基本的碳骨架，是一个重要的中间产物。自1983年克隆第一个查耳酮合酶基因(CHS)［2］以来，CHS就成为科学家感兴趣的一个模式基因，用于研究基因表达和基因家族的进化，并且已经在许多植物中相继分离克隆出来［3－9］。由于查耳酮合酶在花色素苷合成途径中的重要作用，科学家利用正抑制和反抑制等方法抑制CHS基因的表达，从而减少花色素苷的合成和累积，达到改变植物花的颜色，培育新品种的目的［10］。

越橘(Vaccinium spp.)俗称蓝莓，由于果实富含花色素苷等对人体健康有益的抗氧化物质而备受关注。花色素苷的生物合成途径是越橘果实成熟过程中最主要的次生代谢途径之一，通过分离和鉴定越橘花色素苷合成途径的关键酶及相关基因，是深入了解和调控越橘果实花色素苷合成的重要方法。但是目前越橘基因组数据的缺乏给越橘花色素苷等次生代谢途径的研究带来了困难，用新一代测序技术(Illumina/Solexa sequencing)对越橘果实的转录组……