金黄色葡萄球菌TraP蛋白单克隆抗体制备

周雪 ，范志勇 ，汤炜 ，张丽萌 ，李闰婷 ，周瑜 ，崔玉东

（1.黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院，大庆 163319；2.大庆市第四中学）

金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus，S.aureus）是一种重要的人兽共患病原菌[1]，常引起人类局部化脓感染，特别是医院内感染、器械植入感染、肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，严重者可致败血症、脓毒症等全身感染[2]；S.aureus也经常引起动物各种化脓性疾病，如鸡的化脓性关节炎，牛、羊的急性或慢性乳房炎，猪的流产、皮炎，马属动物的创伤感染、脓肿、蜂窝织炎等[3]，给人和动物的健康带来了巨大的危害。防治S.aureus感染的传统方法是抗生素疗法，但由于抗生素的滥用，耐抗生素的新菌株不断出现，特别是耐甲氧西林菌株的蔓延，使得单纯依靠抗生素治疗S.aureus引起的相关疾病越来越无效[4-6]，因此，利用疫苗防治S.aureus感染成为了全球的热点。传统的疫苗主要有全菌灭活疫苗、荚膜多糖疫苗和内毒素疫苗等，多年的研究证实，在临床上的免疫保护作用并不理想[7]。近年的大量研究表明，基因工程疫苗有望成为替代传统疫苗的新型疫苗，基因工程疫苗中最常见的是亚单位疫苗，亚单位疫苗具有针对性强和安全性高等优点[8-9]。实验室对S.aureus ClfA （Clumping factor A）[10]、IsdB （Iron-surface determinant B）[11]、Rap （RNAIII-activating protein）[12]和 TraP（Target of RNAIII-activiting protein）[12]蛋白进行了大量的动物免疫研究工作，我们发现ClfA、IsdA、Rap、IsdB和TraP蛋白都具有良好的免疫保护作用，小鼠免疫试验表明融合蛋白的免疫保护作用高于单个蛋白，但是融合蛋白的表达纯化受到其大小的限制，不能有效的将更多的具有良好免疫保护作用的蛋白融合起来，近年来兴起的表位疫苗能很好地解决这一问题，它可以在不影响有效的抗原活性位点的前提下尽量去除免疫反应性低的蛋白片段，而且可以避免与体内抗原存在的交叉反应[9]。……