PDE4B、BCL－2 在B 细胞非霍奇金淋巴瘤中的表达及其意义

杜 丽，古力巴哈尔·阿不力米提，顾 霞，郭祥萍

B 细胞非霍奇金淋巴瘤是淋巴造血系统肿瘤中最常见的类型，分类繁多、复杂，诊断困难，临床预后较差。磷酸二酯酶(phosphodiesterase，PDE)是催化环腺苷酸(c－AMP)和(或)环鸟苷酸(c－GMP)水解的蛋白酶超家族。PDE4B 对c－AMP 水解失活从而废除c－AMP 对B 淋巴细胞的抑制作用，导致B 淋巴细胞过度增殖［1］。PDE4B 在炎性反应过程中扮演重要角色，因其抑制药具有较强的抗炎作用而作为药物研究的新靶点［2］。BCL－2 是一种抗凋亡蛋白，在多种类型的淋巴瘤中存在高表达，认为与预后不良有关。本研究应用免疫组化技术检测B－NHL 中PDE4B 和BCL－2 的表达，探讨二者在淋巴瘤发生、发展中的作用及对临床诊断、分型的意义。

1 对象与方法

1.1 对象 收集中山大学第一附属医院和新疆医科大学第一附属医院病理科2001－2007 年诊断为B－NHL 的石蜡标本93 例，另选10 例淋巴结反应性增生做为对照。所有病例均做免疫组化CD3、CD5、CD10、CD20、CD23、CD30、CD38、CD79α、BCL－2、BCL－6、MUM－1，按照WHO2008 年淋巴造血组织肿瘤分类方案进行重新分类诊断［3］。

1.2 试剂 PDE4B(美国SIGMA 试剂公司);BCL－2(ZAME 试剂公司);S－P 超敏试剂盒(北京中杉试剂公司)。

1.3 方法 组织用10%中性缓冲甲醛固定，石蜡包埋，切厚度4 μm 切片，采用S－P 免疫组织化学染色方法，常规脱蜡至水化;枸橼酸缓冲液(pH =6.0)中微波加热10 min(95℃)进行抗原修复;一抗(PDE4B、BCL－2 稀释浓度分别为1∶35，1∶50)4℃过夜，DAB 显色，苏木素复染。胆囊癌切片作为阳性对照，以PBS 代替一抗作阴性对照。

1.4 结果判定 根据肿瘤细胞中阳性细胞所占的百分比分为:≤4%为0 分，5% ～15%为1 分，16%～30%为2 分，31% ～50%为3 分，≥51%为4 分;阳性细胞的着色强度分为:无着色或与背景均匀一致的淡黄色为0 分，浅棕黄色为1 分，棕黄色为2分，棕褐色为3 分。……