脑胶质瘤组织中的细胞周期分析与意义*

刘馨莲 殷 舞 李 欣

细胞分子生物学研究认为，肿瘤的本质在于细胞周期的调控紊乱，细胞呈现失控性生长和凋亡减少[1]。细胞周期是细胞生命活动的基本过程，正常细胞周期是指正常连续分裂的细胞从前一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂完成所经历的连续动态过程。主要分为4期：G1期（DNA合成前期）、S期（DNA合成期）、G2期（DNA合成后期）和M期（有丝分裂期）。随着正常细胞周期和肿瘤细胞周期的深入研究，许多学者认为细胞生长周期的失调与多种肿瘤的发生、发展有关，且对肿瘤的恶性生物学行为及肿瘤的预后有重要意义[2-4]。本研究主要探讨细胞周期蛋白（Cyclin）D1、Cyclin A、Cyclin B1和核分裂特异性抗体（PHH3），分别代表G1期、S期、G2期和M期在脑胶质瘤中的表达特征和规律，以期为脑胶质瘤的早期诊断和预后评价提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2003年9月—2008年2月广西壮族自治区人民医院手术切除的脑胶质瘤组织标本59例。其中男31例，女28例，年龄4~73岁，平均（46.2±19.6）岁。根据2000年WHO神经系统肿瘤分类标准：Ⅰ级10例，Ⅱ级15例，Ⅲ级15例，Ⅳ级19例。另外选取同时在该院接受因颅脑损伤行内减压术患者的正常脑组织37例为对照，全部标本均经10%甲醛固定，普通石蜡包埋，4 μm连续切片。

1.2 试剂 鼠抗人Cyclin D1、Cyclin A、Cyclin B1单克隆抗体购自BD Pharmingen公司，兔抗人PHH3多克隆抗体购自Upstate Group LLC公司，S-P试剂盒和SAP-9100试剂盒购自北京中杉生物技术开发公司，DAB试剂盒购自福州迈新生物技术开发公司。

1.3 方法 免疫组化染色采用S-P法。石蜡切片脱蜡水化后，微波抗原修复，过氧化酶阻断剂灭活内源性过氧化物酶活性，羊血清工作液封闭，滴加一抗4℃过夜，滴加生物素标记的二抗，滴加链亲和素—过氧化物酶溶液。……