依达拉奉对脑出血大鼠血肿周围组织Caspase-3和Pdcd-5蛋白表达的影响*

赵 彬 刘 斌 张玉芹

脑出血后通常存在细胞凋亡[1]。依达拉奉（Eda⁃ravone）是一种新型自由基清除剂，具有抗细胞凋亡和神经保护的作用[2]。临床研究表明，依达拉奉对治疗脑出血有确切疗效[3]。本研究旨在观察依达拉奉对大鼠脑出血血肿周围组织胱冬酶-3（Caspase-3）和程序性细胞死亡分子-5（programmed cell death-5，Pdcd-5）蛋白表达的影响及其作用机制，为临床治疗提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料 （1）实验动物：普通级雄性Wistar大鼠102只，体质量250~300 g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，合格证号：Scxk（京）-2010-0001。随机分为假手术组6只、脑出血组48只和依达拉奉治疗组48只。后2组根据动物术后处死时间的不同又分为3 h、6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、5 d及7 d共8个亚组，每组6只。（2）主要试剂：Caspase-3和Pdcd-5多克隆抗体购自北京中杉金桥生物技术有限公司。依达拉奉注射液购自南京先声药业公司，批号040181。

1.2 模型制作 参照李慧等[4]报道的方法，所有大鼠术前禁食、水，以100 g/L水合氯醛（购于天津市大茂化学试剂厂，300 mg/kg）腹腔注射麻醉，俯卧位固定于立体定位仪上，正中切开头皮，以前囟中央为原点，于前囟后1.4 mm，中线向右旁开3.2 mm处用牙科钻钻一直径为1 mm的小孔至颅骨下硬膜，用40℃温水浸泡鼠尾数分钟，消毒后断尾取自体血50 μL。脑出血组和依达拉奉治疗组用微量注射器沿钻孔方向垂直进针，深约5.6 mm，接着缓慢均速推注50 μL血入脑，注血后留针10 min后缓慢退出，拔除后用医用骨蜡封闭骨孔，观察无出血后，缝合头皮，加压包扎尾部。假手术组除不注射自体血外，余操作同出血组。依达拉奉治疗组于脑出血模型制备成功后2 h腹腔内注射依达拉奉3 mg/kg，每日1次，用药到实验结束。……