章培军,郭敏芳,张丽红,杨德兵,孟 健,李加善,马存根,2*
(1.山西大同大学脑科学研究所,山西 大同 037009;2.山西中医学院,山西 太原 030024)
多发性硬化(multiple sclerosis,MS)是发生在中枢神经系统(CNS)的炎性脱髓鞘疾病,由自身免疫功能异常引起,目前尚无有效药物根治。实验性自身免疫性脑脊髓炎 (experim enta l auto immune encephalomyelitis,EAE)是目前研究MS的理想模型。黄芪具有补气升阳,益气扶正,益卫固表等功效,研究表明黄芪可作用于多种免疫活性细胞,促进细胞因子分泌,促进体内抗体形成,通过提高机体免疫功能治疗免疫系统疾病[1-2]。黄芪在多发性硬化的临床治疗中已广泛应用,但其具体的作用机制尚不明确。HQGP是山西中医学院从传统中药膜荚黄芪(A straga lusm embranaceus)中通过浸提法分离到的一种天然植物糖蛋白,体外实验表明其具有一定的免疫抑制作用[3-4]。本研究应用HQGP治疗小鼠EAE模型,通过观察EAE小鼠的临床症状,检测HQGP对EAE小鼠脾脏淋巴细胞的增殖以及分泌细胞因子的影响,探讨HQGP对EAE小鼠的治疗作用及其机理。
雌性C57BL/6小鼠60只,体质量 18~23 g,北京维通利华公司提供;MOG35-55,西安联美生物科技有限公司产品;结核分歧杆菌(TB)购自BD公司;完全弗氏佐剂 (CFA)购自Sigma公司;百日咳毒素(PTX)购自北京毕特博生物技术有限公司;黄氏糖蛋白由山西中医学院实验中心提供。
小鼠按平均体质量随机分为3组,即EAE组、佐剂组和HQGP组 (治疗组),每组20只。在EAE组和治疗组鼠脊柱两侧分3~4点皮下注射MOG35-55(每只0.1 mL),佐剂组以等量生理盐水代替[5]。各组小鼠于免疫后当日(第0 d)和第2 d分别给予腹腔注射百日咳毒素 (PTX)700 ng增强免疫。……