GC-MS快速测定鱼腥草注射剂致过敏介质释放的方法研究

陈 艳， 张永勇， 梁忠丽， 唐 岚， 侯晓蓉

(1.浙江工业大学药学院，浙江 杭州310014;2.中国计量学院生命科学院，浙江杭州310018)

中药注射剂起效快、作用强，尤其在危重疾病急救及感染性疾病、心脑血管疾病、恶性肿瘤等疾病的治疗上具有一定的优势，因而在临床上广为应用［1］。但是，中药注射剂临床不良反应事件近年呈增多趋势［2］，其不良反应主要为过敏反应，约占不良反应的80%，而类过敏反应(pseudoanaphylaxis，anaphylactoid action)又占了过敏反应中的76%［3］。类过敏反应属于非免疫反应［4-5］，不需预先接触抗原物质，也无特异性抗体(IgE)参与，其过敏的关键机制是药理性组胺释放［6］，其释放量与药物剂量和注射速度相关。由于组胺是类过敏反应的主要介质，因此对它的监测在中药注射剂安全性评价中变得尤为重要。

目前对于组胺的检测方法主要有酶联免疫吸附测定法［7-8］(enzyme linked immunosorbent assay ，ELISA);荧光分光光度法和高效液相色谱法等。用ELISA法检测组胺，灵敏度高，方法简便，但价格昂贵，且易出现假阳性结果;HPLC法一方面分析时间长，且样品需要量大，衍生化步骤繁琐［9］，另一方面，HPLC法中常用的衍生化试剂是邻苯二甲醛(OPA)［10］，其存在荧光易淬灭，稳定性差的缺点。相比之下，GC-MS技术检测速度快，只需要15 min便可获得结果，且样品用量小，衍生化反应一步完成。本实验建立了GC-MS测定犬血浆中组胺的分析方法。

1 材料

1.1 药品与试剂 吐温 －80(Tween-80，德国Welding);甲基氨茴霉素(9-methylanthracene，sigma)氯甲酸乙酯(Ethylchloroformate，sigma)均由 Sigma-Aldrich上海微晶生物试剂有限公司提供;组胺磷酸盐(纯度＞99%，Bio basic Inc)由浙江大学生物试剂供应中心提供。三乙胺、无水硫酸酮、无水乙醇，乙酸乙酯，丙酮，三氯甲烷等均为分析纯。……