IGFBP7对人乳腺癌MCF－7细胞增殖的影响及其机制*

袁 磊，左曙光，范文娟，宋国华

(漯河医学高等专科学校，河南 漯河 462002)

胰岛素样生长因子结合蛋白(insulin－like growth factor binding proteins，IGFBPs)是一个能够与胰岛素样生长因子(insulin－like growth factor，IGF)结合的蛋白质家族。根据与IGF亲和力的高低可将IGFBP超家族分成两类:高亲和力IGFBPs(IGFBP1～6)和低亲和力 IGFBPs(IGFBP7 ～ 10)[1]。与高亲和力IGFBPs相比，低亲和力IGFBPs与IGFs的亲和力低5～25倍，这提示低亲和力IGFBPs可能发挥一些与IGFBP家族其它成员不同的生物学作用。IGFBP7 是第一个被证实的低亲和力 IGFBPs[2－3]。IGFBP7在正常人体多种组织、器官中广泛表达，如心脏、脾脏、小肠、大肠、卵巢、乳腺等，然而在多种肿瘤组织中却表达下调甚至缺失，如黑色素瘤、肝癌、肺癌、前列腺癌和乳腺癌等。IGFBP7在正常乳腺导管和小叶上皮细胞均有表达[4]，在衰老的乳腺上皮细胞中过表达(可达正常水平的10倍)[5]，但在乳腺癌组织中表达下降[6]，并且癌组织的侵袭力和恶性程度越高其表达越低[7]。因此IGFBP7可作为特异性标志物用于乳腺肿瘤的病理学和血清学诊断。大量研究表明，IGFBP7可抑制多种肿瘤组织的生长，促进肿瘤细胞的衰老和凋亡。本研究通过构建稳定表达IGFBP7的人乳腺癌MCF－7细胞，探究IGFBP7对人乳腺癌MCF－7细胞增殖的影响及其分子生物学机制。

材料和方法

1 动物

MCF－7细胞购自中国科学院细胞库，大肠杆菌菌株DH5α由学校分子医学实验中心提供。

2 主要试剂

胎牛血清和RPMI－1640培养基购自Gibco;质粒pCMV6－IGFBP7购自OriGene;质粒提取试剂盒、DNA纯化试剂盒购自北京天根公司;限制性核酸内切酶Sgf I和Not I购自大连宝生物公司;Effectene转染试剂盒购自Qiagen;兔抗人IGFBP7、细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal－regulated protein kinases 1/2，ERK1/2)、p － ERK1/2、细胞周期素……