大肠癌手术前后外周血CEA蛋白、CEA mRNA的变化及临床意义

秦海春 刘 俊 杜廷义 范 红 (云南省第一人民医院消化科，云南 昆明 65003)

大肠癌是一种常见恶性肿瘤，在我国恶性肿瘤中居第五位，其发病率和致死率均较高，严重危害人类的健康。癌胚抗原(CEA)作为肿瘤标志物已广泛用于大肠癌的诊断〔1〕，然而其对大肠癌治疗效果的判断目前报道较少。本文检测大肠癌患者手术前后血CEA蛋白、CEA mRNA水平，探讨其在大肠癌治疗效果判断中的价值。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选择2009年1月至2011年6月在我院行手术治疗的大肠癌患者48例，均经X线、肠镜及病理检查确诊。年龄33～75〔平均(47.1±13.8)〕岁，其中男29例，女19例;一年内复发9例。同时选择来我院进行体检的健康体检者50例作为正常对照组，年龄32～76〔平均(48.5±14.3)〕岁，其中男31例，女19例，均无肝、心、肾等脏器疾病。

1.2 方法

1.2.1 血浆CEA蛋白水平检测 分别于治疗前后采集空腹静脉血1.5 ml，加入乙二胺四乙酸二钠抗凝管，4℃ 3000 r/min离心5 min，分离血浆。采用电化学发光免疫法检测CEA，应用Cobase601全自动电化学发光免疫分析仪及其配套试剂，严格按操作规程进行检测，CEA＞10 ng/ml为阳性。

1.2.2 外周血CEA mRNA水平检测 分别于手术治疗前后采集空腹静脉血5 ml，加入枸橼酸钠抗凝管，于1 h内利用TBD公司淋巴细胞分离液进行细胞分离，采用Invitrogen公司Trizol试剂提取总RNA。采用逆转录聚合酶链反应法检测CEA mRNA，试剂盒购自大连宝生物技术有限公司。PCR反应在美国MJResearch公司产PTC－200型PCR仪上进行，反应条件:94℃ 2 min;92℃ 10 s、50℃ 25 s、72℃ 2 s，35 个循环;最后72℃5 min至4℃。引物序列参照相关文献〔2〕，序列如下:上游引物为 5′－AGTGAGTGCAAACCGCAGTGAC－3′，下 游 引 物 为 5′－TTGAGGTTCGCTCCCGAAAG－3′。扩增产物经2.5%琼脂糖凝胶电泳，出现108 bp条带者判定为阳性。……