担载丝裂霉素纳米纤维对膀胱移行细胞癌T24细胞增殖的抑制作用及对细胞周期相关蛋白的影响

岳 鑫 岳 磊 王 丽 (解放军第208医院，吉林 长春 30062)

膀胱癌是泌尿系统中最常见的恶性肿瘤，不论是发病率还是死亡率均占泌尿系统肿瘤的首位。近年来膀胱癌的发病率有上升趋势，多数为移行上皮细胞癌。膀胱移行细胞癌的特点是发病率高、复发率高、治疗复杂。低剂量丝裂霉素(MMC)化疗不但可提高疗效，且减轻毒副作用，与常规化疗剂量方案比较，其增效减毒作用显著。本研究以生物降解高分子材料丙交酯己内酯共聚物(PLCL，LA/CL 80∶20，SFDA认证)为载体制备了新剂型，为验证纳米纤维剂型MMC对膀胱癌细胞的生物学活性，探讨其作用机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞株 人膀胱移行细胞癌细胞株T24购自武汉博士德公司。

1.1.2 可生物降解MMC纳米纤维片 采用电纺丝技术制备载有MMC生物降解丙交酯/己内酯共聚物纳米纤维。药物担载浓度为5%(质量百分比浓度)。MMC购于浙江海正药业股份有限公司(纯度＞99%)。

1.2 方法

1.2.1 人工计数法 所选T24细胞以4×105细胞/ml制备细胞悬液;然后选用24孔培养板接种细胞。将担载MMC的可生物降解载药纳米纱布剪成不同质量的小片，分别为2、4、8 mg，加入不同质量的小片于T24细胞的培养板孔中，日消化细胞3复孔，消化时间为第1、2、3、4、5 天，台盼蓝染色后，使用光学纤维镜及血细胞计数板对受试细胞进行计数。

1.2.2 四唑盐(MTT)比色法 选用生长状态良好的T24细胞，用0.25%胰酶消化为单细胞悬液，调整浓度至5×104/ml，接种于96孔培养板内，每孔200 μl，培养24 h后，加入不同重量的担载MMC的纳米纤维(质量分别为1、2、4、8 mg)，同时需设对照组。每组做3复孔。……