经前期综合征肝气郁证大鼠血清对海马神经元5-HT1AR信号转导通路的影响Δ

金航，张惠云（山东中医药大学中医药经典理论教育部重点实验室，济南250355）

近年来，经前期综合征（Premenstrual Syndrome，PMS）已成为情志病证研究领域的代表性病种，本课题组的前期研究[1]已证实，41.9%的育龄妇女均有不同程度的PMS。PMS肝气郁证是PMS的主要亚型，是肝疏泄不及的表现，是以经前出现抑郁寡欢等情绪异常，月经来潮后症状自行消失为主要临床表现的病证。现已证实PMS症状的发生与中枢神经系统5-羟色胺（Serotonin，5-HT）能神经异常密切相关[2]。Ho HP等[3]等通过对5-HT受体及其与之相耦联的G蛋白研究认为，PMS的产生可能与5-HT受体及其信号转导异常有关。但目前对与编码控制5-HT合成、释放、重摄取、代谢以及受体活性有关的基因研究较少，如5-羟色胺转运体（Serotonin transporter，SERT）基因、单胺氧化酶（Monoamine oxidase，MAO）基因、5-羟色胺1A受体（Serotonin receptor-1A，5-HT1AR）基因等。

为了进一步探索PMS肝气郁证发病的微观作用机制，本课题组从细胞水平研究PMS肝气郁证大鼠血清对海马原代神经元中5-HT1AR、SERT、MAO-A、MAO-B蛋白和基因表达的影响。

1 仪器与材料

1.1 仪器

高速低温离心机（上海天美科学仪器有限公司）；低温冰箱（日本三洋公司）；CO2培养箱（上海力新有限公司）；倒置显微镜（重庆光电仪器有限公司）；Tecan酶标仪（上海麦莎生物科技有限公司）；凝胶成像系统、FR-200A全自动紫外-可见分析仪（上海复日科技有限公司）；PCR扩增仪（大连宝生物工程有限公司）；ks 400图像分析系统（德国Zeiss公司）。

1.2 试药

经前舒颗粒（秦皇岛市山海关制药厂，批号：Z20053087）；神经基质、B27、谷氨酰胺（美国Gibico公司）；胎牛血清、多聚赖氨酸、MAO-B兔抗（批号：M1821）均购自美国Sigma公司；RNAisoTMPlus、Taq HS（不含 dNTP Mixture）、Rnase 抗化剂、dNTP Mixture、DL2 000 marker、Promega的RT反转录试剂盒（大连宝生物工程有限公司）；……