戴巧定 宋欣伟 浙江中医药大学附属第一医院 杭州 310006康海英 杭州市余杭区第五人民医院
类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以慢性多关节肿痛为主要临床表现,严重影响患者生活质量的自身免疫性疾病。确切病因及发病机制迄今不明,其基本病理特征为滑膜炎,细胞因子在滑膜病变中起核心作用,其中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-a,TNF-α)和白介素(interleukin-1β,IL-1β)均是RA发病机制中居中心地位的促炎细胞因子[1]。有研究显示[2-5],RA患者在神经免疫调节方面有诸多异常改变,与多种神经肽有关,其中P物质(substance P,SP)是一种神经递质,在炎症、疼痛的发生机制中都占有重要的地位,对关节炎的发生发展有重要促进作用。雷公藤(Tripterygium wilfordii.Hook)治疗RA疗效肯定,具有缓解症状和改善病情的双重作用[6]。本研究应用佐剂性关节炎大鼠模型,予雷公藤多苷灌胃治疗,观察大鼠血液、关节滑膜等外周组织以及中枢脊髓后角的SP水平的变化,初步探讨其作用机制。
1.1 实验动物 健康Wistar雄性大鼠,体重150±10g,清洁级,由浙江中医药大学实验动物中心提供。1.2 试剂与仪器 不完全弗氏佐剂:Sigma公司;冻干注射用灭毒卡介苗(BCG):上海生物制品研究所;P物质放免试剂盒:北京华英生物技术研究所;TNF-α、IL-1β放免试剂盒:北京北方生物技术研究所;SN-695型智能放免r测量仪:上海原子核研究所日环仪器一厂;GC-911-r-放射免疫技术仪:中国科技大学实业总公司;雷公藤多苷片,上海医科大学红旗制药厂,批号060603,规格10mg/片,临用前用蒸馏水配成0.5mg/mL混悬液。
2.1 模型建立 造模组大鼠右侧后肢足跖部皮内注射0.1 mL完全弗氏佐剂,正常组注射0.1mL生理盐水。……