单热爱, 毕瑞荥, 占丽芳, 钟为东, 叶军明, 王力峰, 郭 锐, 李良东
高渗氯化钠羟乙基淀粉40注射液(hypertonic sodium chloride hydroxyethylstarch 40 injection,HH40),简称高渗盐复合液。本课题组前期研究表明,HH40对脑缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤具有一定的保护作用[1]。本实验采用大脑中动脉线栓法构建大鼠局灶性脑I/R模型[2,3],进一步研究HH40在大鼠急性脑I/R损伤中的抗氧化作用。
1.1 试剂及药物 HH40购自上海长征富民金山制药有限公司,含10.5g 4.2%氯化钠和19g 7.6%羟乙基淀粉40,辅料为注射用水,规格为250ml/瓶。超氧化物歧化酶(Super Oxygen Dehydrogenises,SOD)、谷胱甘肽过氧化物(Glutathion Peroxidase,GSH-Px)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所。
1.2 实验动物 健康雄性SD大鼠24只(购自南昌大学实验动物中心),体重250~300g。随机分成假手术组(A组)、模型组(B组)、HH40低剂量组(C组)、HH40高剂量组(D组),每组各6只。
1.3 脑I/R损伤模型的制备 A组大鼠仅暴露和分离颈总动脉、颈外动脉、颈内动脉,不闭塞大脑中动脉。B、C、D组采用大脑中动脉线栓法制备局灶性脑I/R大鼠模型。在制模成功后50min,舌下静脉穿刺置管,A、B组分别经舌下静脉输注0.9%生理盐水4ml/kg,C、D组分别从舌下静脉输注4、8ml/kg的HH40,均于30min内微量泵恒速输完。术中严格控制室温在23℃ ~25℃,大鼠苏醒后放回鼠笼,自由饮食。
1.4 血清及脑组织生化指标测定 再灌注24h,大鼠麻醉后腹腔静脉取血,4℃、3000转离心10min,取血清,-80℃保存。断头取脑,生理盐水洗净后用滤纸擦干,置冰盘上取损伤侧前脑3/5至4/5部位脑组织约200mg,用眼科剪尽快剪碎组织块装入匀浆器中,制成10%匀浆,4℃、3500转离心10min。取上清液严格按测试盒说明书操作,测定脑组织MDA含量、SOD、GSH-Px活性及血清GSH-Px活性。……