闵大六 沈赞 林峰 徐晓丽 黄文涛 姚阳
1. 上海交通大学附属第六人民医院肿瘤内科,△病理科,上海 200233;2. 复旦大学附属肿瘤医院病理科,复旦大学上海医学院肿瘤学系,上海 200032
骨肉瘤是儿童和青少年最常见的原发性骨恶性肿瘤,其发病原因目前仍不清楚。Runx2是在骨母细胞分化和骨形成中起重要作用的基因,其在骨肉瘤中的作用还不甚清楚。Ezrin是细胞骨架连接膜蛋白,与多种恶性肿瘤如乳腺癌、结直肠癌等的浸润转移有关。本研究拟通过检测骨肉瘤组织中Runx2和Ezrin的表达,探讨二者表达的相关性及其与临床生物学行为之间的关系。
收集上海交通大学附属第六人民医院肿瘤内科2002年1月—2008年5月间临床资料完整的骨肉瘤穿刺活检组织石蜡样本82例。术前均未作过任何化疗或放疗。所有病例均有完整的随访记录,随访时间为3~88个月,中位随访时间为42个月。
鼠抗人Runx2单克隆抗体购自 Abnova公司,兔抗人Ezrin单克隆抗体购自Dako公司。所有组织均为10%甲醛溶液固定,常规脱钙,石蜡包埋,4 μm连续切片,免疫组化采用SP法,按试剂盒说明操作。以随试剂盒提供的已知阳性切片作为阳性对照,以PBS代替一抗作为阴性对照。
以细胞核或细胞质中出现棕黄色颗粒为阳性。每张切片随机选择10个高倍视野,以阳性细胞计数占同类细胞的百分数作为计数点,取其平均值为该病例的细胞阳性率,并据此对染色结果进行评分:阳性细胞率<10%为0分;阳性细胞率11%~25%为1分;阳性细胞率26%~50%为2分;阳性细胞率>5 0%为3分。……