安徽省仔猪腹泻5种病毒感染情况的调查研究

秦谷雨，杨 勇，李 郁，魏建忠，孙 裴，＊

（1.安徽农业大学动物科技学院，安徽合肥230036；2.安徽安泰农业集团，安徽合肥230036）

猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（Porcine transmissible gastroenteritis virus，TGEV）、轮状病毒（Rotavirus，RV）、猪伪狂犬病病毒（Pseudotabie，PRV）、猪圆环病毒2型（Porcine circovirus-2，PCV-2）的单独或混合感染是引起仔猪病毒性腹泻的重要病因［1-3］。各种年龄的猪均对这5种病毒易感，尤其是哺乳仔猪感染率与病死率都很高［4-5］。2010年冬季以来，新生仔猪病毒性腹泻在我国乃至东南亚多个养猪国家呈现高发病率、高死亡率的流行态势，死亡仔猪超过100万头，造成巨大的经济损失［8-9］。目前，我国南方数省（广西、广东、福建、甘肃等省）对其病因的研究表明，病原主要是PEDV的变异株，与韩国2011年流行株的同源性最高［5-7］。但是不同地区有其相应区域性，尚未有研究在安徽省地区造成仔猪病毒性腹泻的病因。本试验旨在探索出安徽省致使仔猪腹泻流行的病毒性病因，为制定适宜安徽省防控仔猪腹泻的措施提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 病料 2011年10月～2012年5月，从安徽地区37个规模化猪场采集腹泻仔猪的粪便或病死猪肠段共计186份（表1），仔猪日龄范围为1日龄～60日龄，其中1日龄～10日龄仔猪120例，11日龄～15日龄仔猪35例，30日龄～60日龄仔猪31例；病料在-80℃保存。PEDV、TGEV、PDV阳性病料由华中农业大学何启盖教授惠赠，PRV和PCV-2阳性毒株由安徽农业大学动物传染病实验室分离、鉴定与保存。

1.1.2 主要试剂 RNAsimple Total RNA kit为OMEGA公司产品；Quant One Step RT-PCR Kit为天根生化科技（北京）有限公司产品；RNA反转录酶、RNA 酶抑制剂、Taq DNA 聚合酶、dNTPs、DNA Marker DL 2000、DNA Marker DL 600等均为宝生物工程（大连）有限公司产品。

1.2 方法

1.2.1 引物设计与合成 参考文献［2，11］以及根据GenBank中已经登录的PEDV、TGEV、PDV、PRV、和PCV-2核酸序列进行引物设计，引物由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。……