抗非洲猪瘟病毒VP73蛋白单克隆抗体的制备

陈 轶，吴晓东，邹艳丽，赵金山，包静月，曹金山，王志亮＊

（1.中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛266114；2.内蒙古农业大学兽医学院，内蒙古呼和浩特010018）

非洲猪瘟（African swine fever，ASF）是一种由非洲猪瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）感染引起的猪的急性、烈性、高度接触性传染病［1］。ASFV是非洲猪瘟病毒科（Asfarviridae）非洲猪瘟病毒属（Asfivirus）惟一成员［2］，为具有囊膜的双股DNA病毒，蜱类是其主要自然宿主和传播媒介［3-4］。ASFV感染猪后以高热、食欲废绝、皮肤和内脏器官出血为临床特征，病死率极高［5］。因此，ASF是世界动物卫生组织（OIE）要求法定报告的动物疫病，也是《中华人民共和国动物防疫法》规定的一类动物疫病［6］。

ASFV整个基因组含有160个～175个开放阅读框（ORF），编码150种～200种蛋白质［7］。根据Pubmed中所列西班牙BA71V分离株全基因序列显示，ASFV基因组含有151个主要阅读框，编码数量众多的蛋白［7］。VP73蛋白是ASFV的主要结构蛋白，由B646L基因编码，全蛋白分子质量约为73 ku［8］。VP73蛋白是病毒粒子20面体衣壳的重要组成部分，产生于病毒感染的晚期，约占整个病毒粒子蛋白的32%［9］。VP73蛋白在ASFV结合和进入易感细胞过程中有很重要的作用［10］，并对病毒粒子衣壳的产生起至关重要的作用［11］。ASFV大多数分离株的毒力都很强，但是免疫原性很低，只有少数几个蛋白具有免疫原性。有研究表明，不同区域ASFV分离株诱导产生的抗VP73蛋白抗体的相应抗原表位都相当保守［12］。VP73蛋白的免疫原性很稳定［13］，可以被用来作为血清学检测和免疫制剂。李倩等［14］对非洲猪瘟病毒VP73蛋白的B细胞表位进行了预测。本研究在对ASFV VP73蛋白主要抗原表位区原核表达的基础上，制备了相应的单克隆抗体。……