侯生库
(青海省果洛州玛沁县兽医站,青海 玛沁814000)
口蹄疫(FMD)是一种高度接触性传染病,对国际贸易具有深远的影响,世界动物卫生组织(OIE)和联合国粮农组织(FAO)将口蹄疫列为A类烈性传染病之首。控制和消灭FMD策略包括疫苗免疫和屠宰可疑畜群。可疑畜群就是被FMDV感染动物和带毒动物。只有将感染动物和隐性带毒动物与疫苗免疫动物加以区分才能为FMD的控制和消灭提供科学的依据。3ABC-I-ELISA方法不但可以检测隐性感染动物而且可以区分感染动物和免疫动物。
1.1 待检血清 血清来源地多年用口蹄疫O型、亚洲Ⅰ型二价灭活疫苗春秋两季注射成年牦牛。秋季注苗后21d采血高倍离心后提取血清,达日46份,久治30份。
1.2 检测试剂 口蹄疫O型正向血凝抗原,批号:100408,来源于中国农业科学院兰州兽医研究所。检测牛血清专用的口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体检测ELISA试剂盒,由中国农业科学院兰州兽医研究所国家口蹄疫参考实验室研制,中国农业科学院兰州兽医研究所生产,批号:2010012208。
1.3 检测方法 按照青海省动物疫病实验室检测技术培训班教材中的O型口蹄疫正向间接血凝试验中的操作进行。按检测牛血清专用的口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体检测ELISA试剂盒使用说明书进行。
2.1 正向间接血凝试验 在对照孔合格的前提下,待检血清免疫抗体效价达到1∶32呈现“++”凝集判定为免疫合格,血清合格率为100%。
2.2 3ABC抗体检测ELISA试验 通过试验得到标准阴性血清OD值为0.488,标准阳性血清OD值为0.053 5。……