猪瘟病毒强弱毒株通用性RT-PCR检测方法研究进展

杨宗照，王剑峰，谢 正，李洪洲 ，陈 阳

（1.杭州市畜牧兽医局，浙江杭州 310020；2.杭州市原种场，浙江杭州 3111153；3.杭州市萧山区畜牧兽医局，浙江杭州 311203）

猪瘟（classical swine fever，CSF）是由猪瘟病毒（CSFV）引起的一种急性、发热性、高度接触性传染病，可导致各年龄猪发病。CSFV为黄病毒科瘟病毒属有囊膜的正链RNA病毒。猪瘟因其流行程度高和致死率高，给养猪业带来了严重损失。OIE将其列为必须通报的传染病。我国将其定为一类传染病。

1955年我国研制出的具有良好免疫效果的猪瘟兔化弱毒株疫苗应用至今，对世界范围内猪瘟疫情的控制做出了重大贡献，目前我国对猪瘟实行强制免疫政策。近年来，CSFV流行毒株在抗原性及毒力方面发生变异[1]，根据E2和NS5B的基因，目前共分为3个主型，10个亚型，即1.1-1.3、2.1-2.3、3.1-3.4亚型[2]。许多国家流行的猪瘟在临床症状和病理变化方面均出现了新变化，出现了典型猪瘟和非典型猪瘟共存、持续感染和隐性感染共存等新特点[3-5]，猪瘟、蓝耳病等疾病混合感染的情况也逐渐增多。猪瘟病理变化不具典型性，且多种病毒混合感染现象日益突出，这些都增加了猪瘟诊断及防控的难度。

国内传统的CSF诊断方法包括免疫荧光试验、病毒分离培养、动物接种试验、新城疫病毒强化试验、酶联免疫吸附试验（ELISA） 、血清学试验等，为CSF的鉴定和诊断提供了有效的手段。但这些方法在特异性、敏感性以及时效性等方面都有各自的不足，不适用于CSFV感染的早期快速诊断。近年来，分子生物学检测技术，尤其是RT-PCR技术发展迅速，使猪瘟的检测变得快速、准确，本文主要对猪瘟强、弱毒株通用的RT-PCR检测技术作以综述，以期为CSFV检测及防控工作提供参考。……