猴头菇多糖对TGF-β1抑制的T淋巴细胞增殖的影响

郭 焱，崔健丽，朱 娜

（1.长春中医药大学，吉林 长春 130117；2.吉林大学第四医院）

猴头菇多糖对TGF-β1抑制的T淋巴细胞增殖的影响

郭 焱1，崔健丽2＊，朱 娜1

（1.长春中医药大学，吉林 长春 130117；2.吉林大学第四医院）

＊通讯作者

猴头菇多糖对免疫系统的药理作用已有报道［1－4］，但多是有关动物免疫功能的研究，而对人类免疫功能影响的报道尚不多见。本实验从细胞水平研究猴头菇多糖对TGF－β1抑制的T淋巴细胞的逆转作用，为临床辅助治疗肿瘤提供实验依据。

1 材料和方法

1.1 材料猴头菇多糖、TGF-β1、淋巴细胞分离液、PHA、MTT等试剂均购自百赛生物科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 人外周血T淋巴细胞的分离 取正常人静脉抗凝血10ml，淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞（PBMC）。PBMC经PBS洗涤3次后，加RPMI 1640完全培养液，于无菌培养皿黏附贴壁培养6 h，收集非贴壁细胞，即为淋巴细胞，用含100ml／L胎牛血清的RPMI1640培养液调整细胞密度为5×108／L，备用。

1.2.2 MTT法检测猴头菇多糖对TGF－β1抑制下T淋巴细胞增殖的作用 设对照组、TGF-β1组、猴头菇多糖组。取密度为5×108／L的备用细胞，接种于96孔培养板，每孔100μl（含细胞数为5×104）。然后，对照组加100μl含100ml／L胎牛血清的RPMI1640培养液，TGF-β1组加入100μl含 TGF－β1的培养液，猴头菇多糖组加入100μl含TGF-β1和含猴头菇多糖的培养液，每组均设3个复孔，定容为200 μl，置CO2培养箱中分别培养24h、48h、72h，之后各组加PHA（终浓度5mg／L）继续孵育42h。于实验终止前每孔加入5g／L MTT10μl，继续培养6h，弃上清液，每孔加入100μl DMSO，充分震荡后，37℃孵育1h，用酶标仪于570nm波长测定A值。

细胞增殖率＝ （实验组平均A值／对照组平均A值）×100%。

1.2.3 统计学分析 实验数据用SPSS软件进行方差分析两两比较，以P＜0.05为差异有统计学意义。……