郑 斌,王 欣,麻彤辉*
(1.吉林大学 白求恩医学院,吉林 长春 130021;2.吉林大学第二医院 中心实验室,吉林 长春 130041)
胡椒碱对人肝癌HepG2细胞抗肿瘤活性的体外实验研究
郑 斌1,王 欣2,麻彤辉2*
(1.吉林大学 白求恩医学院,吉林 长春 130021;2.吉林大学第二医院 中心实验室,吉林 长春 130041)
目的 探讨胡椒碱(piperine)对人HpeG2肝癌细胞株的增殖、杀伤和细胞凋亡的影响,为肝癌的治疗提供理论依据。方法体外培养的HpeG2细胞,采用MTT比色法检测不同浓度胡椒碱对体外培养的HepG2细胞和新分离的外周血白细胞的增殖抑制作用。Hoechst 33258染色观察细胞凋亡形态,采用流式细胞术测定胡椒碱对HepG2细胞的凋亡。结果胡椒碱对HepG2细胞增殖的抑制率随着浓度的升高而增加,半量抑制浓度(IC50)为15.13±3.21μmol/L,低于其对外周血白细胞的抑制率(64.52±5.32μmol/L)。Hoechst 33258染色后,胡椒碱处理癌细胞组表现出典型的细胞凋亡特征,流式细胞仪检测20μmol/L的胡椒碱处理HepG2细胞24h后,细胞凋亡率由对照组的2.89%上升到了21.76%。结论胡椒碱具有抑制HepG2细胞增殖和诱导凋亡的抗肿瘤活性,有应用于肝癌治疗的潜在价值。
胡椒碱;肝癌;HepG2;细胞凋亡
(ChinJLabDiagn,2012,16:0218)
Pradeep CR等人[1研究发现胡椒碱可抑制B16F-10黑色素瘤诱导的肺转移,明显减少肿瘤的形成,延长荷瘤小鼠存活期。这说明胡椒碱有抗肿瘤转移的作用。但是未见胡椒碱对人肝癌HepG2细胞的报道,本文报道胡椒碱在体外对人肝癌HepG2细胞株生长及凋亡的影响。
1.1 试剂胡椒碱(中国药品生物制品检定所),1640培养基(sigma),DMED 培养基(sigma),四甲基偶氮唑盐(MTT试剂盒)(罗氏诊断),胎牛血清(Hyclone),Hoechst 33258(sigma),细胞凋亡试剂盒(碧云天生物技术研究所),人外周血白细胞分离液(天津TBD公司),细胞板(corning),流式细胞仪(美国Beckman Coulter公司),多功能酶标仪(美国Thermo公司)。……