LHRH-PE40诱导分化胃癌细胞凋亡的研究

姜 洋，田小川，崔春国，王凌燕，朱 平

（1.吉林大学中日联谊医院a.结直肠外科；b.乳腺外科；c.心血管内科，吉林 长春 130033；2.解放军军事医学科学院11所）

LHRH-PE40诱导分化胃癌细胞凋亡的研究

姜 洋1a，田小川1a，崔春国1b，王凌燕1c＊，朱 平2

（1.吉林大学中日联谊医院a.结直肠外科；b.乳腺外科；c.心血管内科，吉林 长春 130033；2.解放军军事医学科学院11所）

目的 研究 NF-κB mRNA和Caspase-3mRNA及其蛋白在诱导分化BGC-823细胞中的表达，探讨LHRH-PE40与胃癌细胞凋亡的关系。方法应用RT-PCR、Western blot法检测BGC-823细胞中NF-κB P65mRNA、Caspase-3mRNA表达及其蛋白的表达情况。结果LHRH-PE40诱导BGC-823细胞凋亡时，NF-κB mRNA和Caspase-3mRNA表达水平有所增加，NF-κB P65和Caspase-3P20活性片段也增加。结论LHRH-PE40可以诱导胃癌细胞内NF-κB的活化；引起Caspase-3级联反应，促进细胞凋亡。

LHRH-PE40；胃癌，细胞凋亡

（ChinJLabDiagn，2012，16：0221）

LHRH-PE40作为毒性部分的绿脓杆菌外毒素A（PE40）进入细胞质，通过抑制蛋白质合成杀伤靶细胞［1，2］。由实验证实，LHRH-PE40作为一种免疫毒素不但杀伤细胞，同时能够促进细胞凋亡。核转录因子-κB（NF-κB）在细胞凋亡中起着重要作用；Caspase-3是凋亡的关键酶和执行者，在各种细胞中均有表达。本研究应用RT-PCR、Western blot法，研究 NF-κB mRNA 和 Caspase-3mRNA 及其蛋白在LHRH-PE40诱导分化BGC-823细胞中的表达，旨在探讨NF-κB和Caspase-3与胃癌细胞凋亡的关系。

1 材料和方法

1.1 BGC-823细胞的收集及裂解

BGC-823细胞株，由长春基因工程药物研究所提供。① 弃培养液，洗细胞。② 每孔加入1ml PBS，用细胞刮将细胞刮下转移至离心管中离心。③ 向离心管中加入细胞裂解液煮沸，离心。

1.2 实验分组

实验对象分2组：正常BGC-823细胞组；0.2 μg／ml LHRH-PE40诱导BGC-823细胞48h组。

1.3 蛋白质含量的测定—免疫印迹法（Western blot）

①提取蛋白质样品，沉淀，冷却，离心后取上清。②转膜。③洗涤，漂洗，夹滤纸中，待照相记录，分析结果。……