柱前衍生化法测定晶帽石斛中总氨基酸含量*

李光，李学兰，陈曦，2

(1.中国医学科学院、北京协和医学院药用植物研究所云南分所，云南景洪666100;2.中国医学科学院、北京协和医学院药用植物研究所，北京100193)

石斛为名贵中药材，在我国有悠久的药用历史，被《神农本草经》列为上品，认为该药“味甘、平。主伤中，除痹，下气，补五脏虚劳羸瘦，强阴。久服厚肠胃，轻身延年。”目前广泛用于保健品、药品及石斛汤、石斛酒等饮品。目前市场流通石斛样品多为铁皮石斛、齿瓣石斛、晶帽石斛、金钗石斛等及其枫斗类，临床也多将这几种石斛混合应用。其中晶帽石斛(Dendrobium crystallinumTchb.F.)种植技术要求低，产量较高，具有较高的经济价值。笔者在本实验中针对晶帽石斛中营养成分氨基酸类进行测定，以期完善晶帽石斛基础研究，为后期药效学研究提供理论依据。

目前已经报道的用于氨基酸柱前衍生的衍生试剂很多，主要有2，4-二硝基氟苯(DNFB，2，4-Dinitrofluoro benzene)[1]、邻苯二甲醛(OPA，O-Phthalic aldehyde)[2]、氯甲酸芴甲酯(VMOC-Cl，9-fluorenylmethyl chloroformate)[3]、异硫氰酸苯酯(PITC，phenyl isothiocyanate)[4]、丹磺酰氯(Dansyl-C1，Dansylchloride)[5]及6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯(AQC，6-Aminoquinolyl-N-hydroxysuccinimicly carbamate)[6]等。不同的衍生剂都有各自的不足，其中DNFB作为衍生剂具有成本低、衍生产物稳定、操作简便等优点，被广泛应用。笔者利用DNFB柱前衍生化方法针对晶帽石斛中总氨基酸类成分进行测定。

1 仪器与试药

1.1 实验药材晶帽石斛药材购自晶帽石斛种植户，样品信息见表1。

表1 晶帽石斛样品信息表Tab.1The sample informations ofDendrobium crystallinum Tchb.F.

1.2 实验试剂醋酸钠(成都格雷西亚化学技术有限公司，分析纯，批号:20100322)，醋酸(天津市光复精细化工研究所，分析纯，批号:20081112)，N，N-二甲基甲酰……