氯化血红素对全脑缺血/再灌注大鼠海马CA1区神经元凋亡和caspase-3表达的影响

刘 杰，郭新庆，刘辉琦，刘瑞欣，庞明泉，吴 穹

(1青海大学医学院病理生理教研室，西宁 810001;2山东荷泽医学专科学校;3青海大学医学院2008级临床本科班)

脑缺血再灌注损伤(I/R)是指脑缺血致脑细胞损伤，恢复血液再灌注后其缺血性损伤反而进一步加重的现象。海马是脑组织边缘系统的重要组成部分，CA1区神经元对缺血缺氧性损伤高度敏感，缺血缺氧后大量神经元死亡，其中细胞凋亡明显。研究发现，氯化血红素(Hemin)，即含铁原卟啉IX，不仅用于治疗贫血，且对缺血缺氧性器官损伤具有一定的保护作用［1，2］。2011 年 5 月 ～2012 年 1 月，我们观察了不同条件下Hemin给药对大鼠 I/R海马CA1区神经元凋亡和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3表达的影响，报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料 雄性Wistar大鼠138只，清洁级，由兰州大学医学院实验动物中心提供(在我院实验室饲养1个月，待大鼠体质量至280～330 g后开始实验)。将138只大鼠随机分为对照组6只，I/R组6只，预防1组～预防15组、治疗1组～治疗6组各6只。药物与试剂:Hemin试剂购于美国Sigma公司，将Hemin配制为浓度60 mg/ml、pH=7.4的溶液;凋亡细胞原位细胞凋亡检测试剂盒购自北京中昊时代生物公司;caspase-3免疫组化染色试剂盒购自武汉博士德生物工程公司。

1.2 实验方法

1.2.1 模型制备及处理 I/R组、各预防组及治疗组采用传统的Pulsinelli四血管闭塞法建立动物全脑缺血模型:10%水合氯醛360 mg/kg腹腔注射全麻、腹卧位固定，充分暴露颈背部，自双耳前缘连线正中为起点向背部做长约1.5 cm的纵行切口，钝性分离，暴露双侧翼状孔，用改制的电凝器快速……