中药中速灭威残留量的酶联免疫检测方法

张曙光，王俊平，生 威，张 燕，王 硕

(食品营养与安全教育部重点实验室，天津科技大学食品工程与生物技术学院，天津 300457)

中药中速灭威残留量的酶联免疫检测方法

张曙光，王俊平，生 威，张 燕，王 硕

(食品营养与安全教育部重点实验室，天津科技大学食品工程与生物技术学院，天津 300457)

建立了直接竞争酶联免疫法(ELISA)测定金银花、枸杞、人参、板蓝根、大青叶和圆弧止痛片为代表的中药中速灭威的残留量．金银花等经过粉碎，加入甲醇提取、旋蒸、PBS复溶等简单前处理之后，再经过适度的稀释可以达到消除基质影响，用ELISA进行测定．中药样品添加回收率为64.00%～91.30%，变异系数均小于30.12%．结果表明，该方法可以简单、快速、灵敏、准确地检测出金银花、枸杞、人参、板蓝根、大青叶和圆弧止痛片等中药中速灭威的残留量.关键词：ELISA；中药；速灭威；检测

1 材料与方法

1.1 药材、试剂及仪器

金银花(Lonicera chrysantha)、枸杞(Lycium chinense)、人参(Radix Ginseng)、板蓝根(Radix Isatidis)、大青叶(Folium Isatidis)、元胡止痛片(Yuanhu painkillers)，天津市塘沽区某药店；速灭威标准品、吐温20、3，3'，5，5'–四甲基联苯胺(TMB)，美国Sigma公司；小牛血清蛋白(BSA)，Merck 公司；速灭威抗体、辣根过氧化物酶(HRP)酶标抗原，天津市食品营养与安全重点实验室．

酶标仪，Thermo 公司；单道、8道微量可调移液器，Gilson 公司；涡旋混合器，北方同正公司；离心机，德国Eppendorf公司；旋转蒸发仪，上海亚荣生化仪器厂；442404酶标板，NUNC公司．

1.2 直接竞争酶联免疫法的建立

包被：抗体每孔1,μg包被在酶标板上，室温孵育过夜或37,℃孵育3,h，PBST洗板3次．

封闭：用封闭液(每孔200, μL，1%BSA)室温封闭1,h，然后弃去封闭液，PBST洗板3次．

酶标抗原和标样……