魏丹,窦文芳,李恒,李会,许正宏,,史劲松
1(江南大学 医药学院,江苏 无 锡,214122)
2(江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡,214122)
高效降解褐藻胶新菌种的筛选、鉴定及产酶条件优化*
魏丹2,窦文芳1,李恒1,李会1,许正宏1,2,史劲松1
1(江南大学 医药学院,江苏 无 锡,214122)
2(江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡,214122)
以褐藻酸钠为唯一碳源,从腐烂的海带中筛选出1株高效降解褐藻胶的菌株,根据其形态学特征、生理生化特性和16S rDNA序列分析鉴定该菌株属于白蚁菌属(Isoptericola),命名为嗜盐白蚁菌WX(Isoptericola halotolerans WX)。菌株WX的最佳培养基组成为:褐藻酸钠6 g/L、蛋白胨5 g/L、酵母粉2.5 g/L、NaCl 25 g/L、MgSO42 mmol/L、CaCl20.5 mmol/L、KH2PO41 mmol/L、FeSO40.2 mmol/L、MnSO40.3 mmol/L;摇瓶最佳培养条件为:250 mL三角瓶装瓶量50 mL,pH 8.0,培养温度25℃,摇床转速180 r/min,培养时间44 h。2 mmol/L Mg2+和0.2 mmol/L Fe2+对酶活力有明显的促进作用。在优化后的培养条件下,褐藻胶裂解酶活力达到432 U/mL,较优化前提高了13倍。此外,嗜盐白蚁菌WX同时具有淀粉酶和褐藻胶裂解酶活性,具有广泛的应用前景。
褐藻胶裂解酶,嗜盐白蚁菌,褐藻寡糖,筛选,产酶条件优化,淀粉酶
褐藻胶是一种酸性多糖,为β-D-甘露糖醛酸(β-D-1,4-mannuronic acid,简称M)和α-L-古洛糖醛酸(α-L-1,4-guluronicacid,简称G)以C-1,4糖苷键非均聚形成的线性分子,无分支和侧链,相对分子质量可达3.2万~18.6万[1]。褐藻寡糖是褐藻胶的降解产物,具有抗肿瘤、抗凝血、抗氧化作用,还能够促进多种植物的根部生长,起到延长植物生命周期的作用。褐藻胶裂解酶可通过β-消去反应降解褐藻胶,并在非还原性末端C 4,5之间形成不饱和双键[2],是褐藻寡糖的酶法制备的主要途径。
根据底物专一性,褐藻胶裂解酶可分为聚甘露糖醛酸裂解酶(EC 4.2.2.3)和聚古罗糖醛酸裂解酶(EC 4.2.2.11)[3]两种类型。……