汪东升,张翠英,彭晓培,周磊,肖冬光
(工业发酵微生物教育部重点实验室,天津科技大学生物工程学院,天津300457)
木糖母液发酵生产2,3-丁二醇的研究
汪东升,张翠英,彭晓培,周磊,肖冬光*
(工业发酵微生物教育部重点实验室,天津科技大学生物工程学院,天津300457)
对4株2,3-丁二醇生产菌株利用木糖的能力进行比较,其中肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae CICC 10011)具有最佳的发酵性能,并以该菌为出发菌株对其利用木糖母液发酵2,3-丁二醇进行研究。首先通过单因素试验研究木糖母液和氮源对2,3-丁二醇发酵的影响,然后采用L9(34)正交试验优化发酵培养基的主要成分,优化后的培养基组分为,木糖母液 90g/L,玉米浆 12g/L,K2HPO47g/L,KH2PO42 g/L,(NH4)2SO42 g/L,柠檬酸钠 3 g/L,MgSO4·7H2O 0.1 g/L,FeSO4·7H2O 0.005 g/L,MnSO4·7H2O 0.005 g/L,ZnSO4·7H2O 0.01 g/L。在优化后的发酵培养基中进行摇瓶发酵,72 h发酵2,3-丁二醇浓度为35.7 g/L,比优化前增加了7.5 g/L,2,3-丁二醇得率达到了理论得率的92%。
菌种筛选;木糖母液;2,3-丁二醇;培养基优化
Abstract:Four 2,3-butanediol producing strains were compared to utilize xylose,in which Klebsiella pneumoniae CICC 10011 was the best,with which as the starting strain xylose mother liquor was used to produce 2,3-butanediol.Firstly,single-factor experiments were carried out to study the effects of xylose mother liquor and nitrogen source.The fermentation medium was then optimized by orthogonal design.The optimized composition was as follows:xylose mother liquor 90 g/L,CSLP 12 g/L,K2HPO47 g/L,KH2PO42 g/L,(NH4)2SO42 g/L,sodium citrate 3 g/L,MgSO4·7H2O 0.1 g/L,FeSO4·7H2O 0.005 g/L,MnSO4·7H2O 0.005 g/L,ZnSO4·7H2O 0.01 g/L.Under above conditions,final concentration of 2,3-butanediol reached 35.7 g/L,7.5 g/L higher than that under the initial conditions,the yield was 92%of the theory.
Key words:strain screening;xylose mother liquor;2,3-butanediol;medium optimization
2,3-丁二醇是一种无色无味的手性化合物,存在3 种旋光异构体,分别为 D-(-)-2,3-丁二醇,L-(+)-2,3-丁二醇和 meso-2,3-丁二醇[1-2]。作为一种大宗化学品,广泛应用于化工、食品、医药、燃料以及航空航天等多个领域。目前,利用微生物发酵生产2,3-丁二醇已经获得广泛的研究,其常见原料为淀粉水解液、糖蜜、乳清等[3-4],成本较高。其中木质纤维原料含糖量丰富,来源广泛,成本较低,经过化学和生物的处理可以用以生产2,3-丁二醇。玉米芯作为一种木质纤维素原料,在我国有广泛的来源。木糖母液是以玉米芯为原料生产木糖醇工业中的副产物,混合糖含量高,主要成分是木糖,还有少量的阿拉伯糖和葡萄糖[5]。……