秦菊滴眼液治疗家兔实验性结膜炎的实验研究

刘宏伟郭崧王文周毅

秦菊滴眼液治疗家兔实验性结膜炎的实验研究

刘宏伟1郭崧2王文2周毅1

目的观察中药制剂秦菊滴眼液对实验性结膜炎的治疗效果。方法采用结膜下埋线的方法，造成家兔结膜的炎症，使用含生药0.42 g/ml、0.21 g/ml和0.105 g/ml的秦菊滴眼液进行治疗，以溶剂为阴性对照，珍珠明目滴眼液为阳性对照。治疗前、治疗后第7天、第14天观察记录结膜病变和角膜病变情况。结果治疗后第14天，0.42 g/ml秦菊滴眼液组和珍珠明目滴眼液组的结膜病变轻于溶剂对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；0.42 g/ml秦菊滴眼液组和珍珠明目滴眼液组的治愈率高于溶剂组，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论0.42 g/ml秦菊滴眼液对家兔实验性结膜炎有治疗作用。

秦菊滴眼液；实验性结膜炎；治愈率；家兔；结膜下埋线

结膜炎为眼科常见病，分为急性、亚急性和慢性；由于结膜大部分暴露于外界，容易受到微生物、风尘、理化物质的刺激而产生炎症，因此根据病因可分为细菌性、病毒性、衣原体性、真菌性、变态反应性等。本实验采用结膜下埋线的方法，造成家兔结膜的炎症，观察中药制剂秦菊滴眼液对实验性结膜炎的治疗作用。

1 材料与方法

1.1 药品

秦菊滴眼液（北京博雅康泰生物工程科技有限公司）由秦艽、秦皮和菊花组成，经提取后，加入氯化钠、透明质酸钠、NaH2PO4·2H2O、Na2HPO4·12H2O、吐温80，调节渗透压和pH值。制剂分为3个剂量用于实验，即含生药0.42 g/ml、0.21 g/ml和0.105 g/ml。按高效液相色谱法（high performance liquid chromatography，HPLC）测定，0.42 g/ml秦菊滴眼液中秦艽以龙胆苦苷计，不低于1.5 mg/ml；秦皮以秦皮甲素计，不低于0.14 mg/ml；菊花以木犀草素计，不低于0.1mg/ml。阳性对照药为珍珠明目滴眼液（江西珍视明药业有限公司），阴性对照为溶剂（北京博雅康泰生物工程科技有限公司），含有氯化钠、透明质酸钠、NaH2PO4·2H2O、Na2HPO4·12H2O、吐温80。

1.2 家兔结膜炎模型的制备

家兔30只，兔龄为4个月，雌雄各半，体质量2.0～2.2 kg［北京通利实验动物技术有限公司，许可证编号为SCXK（京）2005-002］。实验前双眼点氧氟沙星滴眼液（北京同仁医院）以预防感染，盐酸奥布卡因滴眼液（参天制药株式会社）表麻，在上方球结膜距角膜缘2 mm处，使用弯针将7号线（强生中国医疗器材有限公司）缝入结膜下，范围为10点～2点，两端不露线头。

1.3 分组与治疗

造模后第2天根据病变的评分将实验动物分为病变程度基本一致的5组，每组6只家兔（12只眼），分别为溶剂组，0.105 g/ml秦菊滴眼液组，0.21 g/ml秦菊滴眼液组，0.42 mg/ml秦菊滴眼液组，珍珠明目滴眼液组。分组后开始治疗，每眼滴注药物50 μl，4次/日。

1.4 病变观察

观察治疗前、治疗后7 d、14 d时结膜及角膜的病变情况，并对病变程度进行评分记录。

1.5 病变程度评分

1.5.1 结膜病变评分〔1〕：包括充血、水肿、分泌物3个子项，结膜病变评分为该3项评分之和。（1）充血：0分，血管正常；1分，血管充血呈鲜红色；2分，血管充血呈深红色，血管不易分辨；3分，弥漫性充血呈紫红色。（2）水肿：0分，无水肿；1分，轻微水肿（包括瞬膜）；2分，明显水肿，伴有部分眼睑外翻；3分，水肿导致眼睑近半闭合；4分，水肿导致眼睑超过半闭合。（3）分泌物：0分，无分泌物；1分，少量分泌物；2分，分泌物使眼睑和睫毛潮湿或粘着；3分，分泌物使整个眼区潮湿或粘着。

1.5.2 角膜病变评分〔2〕：用2%荧光素染色角膜，加蓝色滤色片观察，角膜出现细小染色点，为点染，如角膜缘出现溃疡，为浸润；加绿色滤色片观察角膜缘，如有结膜血管长入角膜，为血管翳。评分如下：0分，正常；1分，点染；2分，浸润；3分，血管翳。

1.6 疗效评价

比较治疗后第7天和第14天，各组结膜和角膜病变评分，并做统计学分析，确定治愈和未愈标准。治愈：治疗14天后病变评分为0分；未愈：治疗14天后病变评分大于等于1分。治愈率=治愈眼数/（治愈眼数+未愈眼数）×100%。

1.7 统计学方法

使用SPSS 16.0进行统计学分析。结膜病变和角膜病变评分以均数±标准差表示，采用单因素方差分析进行比较，P＜0.05时，差异有统计学意义；治愈率的比较采用卡方检验，P＜0.05时，差异有统计学意义。

2 结果

2.1 结膜病变评分比较

治疗前，各组的病变评分接近，无统计学意义的差异（P＞0.05）。治疗后第7天，珍珠明目滴眼液组评分低于溶剂组和0.21 g/ml秦菊滴眼液组（P＜0.05），0.42 g/ml秦菊滴眼液组评分低于0.21 g/ml秦菊滴眼液组（P＜0.05）；珍珠明目组与0.42 g/ml秦菊滴眼液组评分相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后第14天，0.42 g/ml秦菊滴眼液组评分低于溶剂组和0.105 g/ml秦菊滴眼液组（P＜0.05），珍珠明目滴眼液组评分低于溶剂组（P＜0.05）；珍珠明目组与0.42 g/ ml秦菊滴眼液组评分相比，差异无统计学意义（P＞0.05）（表1）。

表1 各组实验性结膜炎家兔各时期结膜病变评分（±s，样本数=12只眼）

表1 各组实验性结膜炎家兔各时期结膜病变评分（±s，样本数=12只眼）

注：治疗前各组比较，P＞0.05。治疗后，①与溶剂组相比，P＜0.05；②与0.21 g/ml秦菊滴眼液组相比，P＜0.05；③与0.105 g/ml秦菊滴眼液组相比，P＜0.05（单因素方差分析）

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2.2 角膜病变

治疗前至治疗后14 d，各组实验兔眼未发现有角膜病变。

2.3 治愈率比较

比较14天后各组病变评分为0、1和2的眼数，计算各组的治愈率（表2）。0.42 g/ml秦菊滴眼液组和珍珠明目滴眼液组的治愈率均高于溶剂组，差异有统计学意义（P＜0.05）；但这2组之间的差异不明显（P＞0.05）。0.105 g/ml、0.21 g/ml秦菊滴眼液组与溶剂组分别比较，差异无统计学意义（P＞0.05）（表2）。

表2 各组实验性结膜炎家兔治疗14 d后的病变评分和治愈率

3 讨论

结膜分为上皮层及固有层。上皮层由多层结膜上皮细胞构成，上皮细胞层内含有杯状细胞，固有层内含有结缔组织、血管及神经系统。结膜大部分表面暴露于外界，当防御能力减弱或外界致病因素增强时，会引起结膜组织的炎症发生〔3〕。特别说明的是，进入结膜的异物，如金属、木材碎屑、尘埃颗粒及手术缝线等，由于其抗原性不同和对结膜的局部物理刺激，可引起不同程度的结膜炎症反应。结膜炎主要体征有结膜充血、分泌物、乳头增生、结膜水肿和滤泡等。如果炎症持续时间长，可造成睑结膜肥厚、粗糙、伴有眦角溃疡或溃疡性睑缘炎。

秦菊滴眼液由秦艽、秦皮和菊花组成。秦艽具有抗炎、调节中枢系统、调节免疫系统、保肝、抗氧化、升血糖等作用〔4〕；秦皮具有抗病原微生物、抗炎镇痛、抗肿瘤、抗氧化以及神经保护和血管保护等作用〔5〕；菊花具有抗炎、镇痛、抗病毒、抗菌、抗衰老、抗肿瘤等作用〔6〕。秦菊滴眼液中的3味药都有抗炎作用，协同使用有助于对家兔实验性结膜炎的治疗。珍珠明目滴眼液对实验性结膜炎有治疗作用〔7〕，我们因此选用此药作为阳性对照。

使用结膜下缝线的方法〔2〕，使异物进入结膜，造成家兔非感染性结膜炎，病变主要以炎症反应和免疫反应为主，因此抗炎是治疗此类结膜炎的首选。结膜炎一般很少影响角膜，我们在实验中也将角膜因素加以考虑，以防出现角膜受累的情况。

我们在实验中发现，0.42 g/ml秦菊滴眼液组病变第7天显著轻于0.21 g/ml秦菊滴眼液组，第14天显著轻于0.105 g/ml秦菊滴眼液组；第7天，珍珠明目滴眼液组病变也轻于0.21 g/ml秦菊滴眼液组；第14天，0.42 g/ml秦菊滴眼液组和珍珠明目滴眼液组结膜病变显著轻于溶剂对照组，它们的治愈率也显著高于溶剂组，说明高浓度的秦菊滴眼液有效，低浓度的药物不足以抑制异物所造成的结膜炎症。

我们只观察了治疗14 d的病变情况，这是因为，结膜下埋线首先造成结膜的急性炎症，表现为结膜极度充血，水肿和大量分泌物，以后结膜病变逐渐减轻，第7天时，埋线的结膜下存在大量炎症细胞，第14天时，埋线被纤维组织部分包裹〔8〕。因此，只要埋线存在，炎症会一直存在，只有当纤维组织将其包裹，隔离机体的免疫系统，炎症才会消失。在第14天时，结膜病变已出现自愈倾向，药物对以后的结膜病变影响较小。

临床上慢性结膜炎病因复杂〔9〕，治愈比较困难〔10〕，但是不论何种结膜炎，抗炎是首要任务，秦菊滴眼液是中药制剂，具有广泛的抗炎作用，为治疗慢性结膜炎增加了一种选择。

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Experimental study of Qinju eye drops on rabbits experimental conjunctivitis

LIU Hongwei，GUO Song，WANG Wen，et al.Beijing Tongren Eye Center，Beijing Tongren Hospital，Capital Medical University；Beijing Ophthalmology&Visual Sciences Key Lab；Beijing Institute of Ophthalmology，Beijing 100005，China

OBJECTIVETo examine the clinical effects of Qinju eye drops on rabbit experimental conjunctivitis.METHODSConjunctivitis was prepared by subconjunctival line embedding.Qinju eye drops（0.42，0.21 and 0.105g/ml）were used for treatment，solutions for negative control and Zhenzhu Mingmu eye drops for positive control group.Conjunctival lesion and corneal lesion were examined and recorded before treatment and on the 7th and 14th day after treatment.RESULTSOn the 14th day，the conjunctival lesions of Qinju（0.42g/ml）and Zhenzhu Mingmu eye drops group were significantly lighter than that of solutions group（P＜0.05）.The cure rates of Qinju（0.42g/ml）andZhenzhuMingmueyedropsgroupweresignificantlyhigherthanthatof solutions group（P＜0.05）.CONCLUSIONSQinju eye drops（0.42g/ml）had some therapeutic effects on rabbit experimental conjunctivitis.

Qinju eye drops；experimental conjunctivitis；cure rate；rabbit；subconjunctival line embedding

R285.5；R777.31

A

1002-4379（2012）04-0239-03

北京市科技计划课题资助项目（Y0204002041331）

1首都医科大学附属北京同仁医院，北京同仁眼科中心；北京市眼科学与视觉科学重点实验室；北京市眼科研究所，北京100005

2北京博雅康泰生物工程科技有限公司

刘宏伟，E-mail：hw65@sohu.com