马氏珠母贝精子质量形态评定中不同染色法染色效果的比较

宾承勇，王梅芳，豆伟，余祥勇

(广东海洋大学水产学院，广东湛江524025)

马氏珠母贝Pinctada martensii是培育海水珍珠的主要母贝，广泛分布于中国广东、广西和海南沿海。多年来，各科研单位在马氏珠母贝育苗养殖［1-3］、插核育珠［4-7］、良种选育［8-12］、病害防治等方面［13-15］已做了大量的研究。随着苗种生产、遗传育种、种质保藏等研究的进一步发展，对贝类精子的质量评价显得越来越迫切和重要。目前，关于精子质量评价主要集中在鱼类及蟹类等方面［16-21］，而在贝类方面的研究还处于起步阶段。精子形态是其质量的一个重要表征，是评价精子功能最有价值的指标之一，所以精子形态检测是精子质量评价的常规指标之一。有关珠母贝精子的研究主要集中在精子的发生、超微结构及冷冻保存方面［22-26］，有关精子质量检测方面的研究仅见喻达辉等［27］对精子活力的光镜观测，而有关精子的活体染色法与观察检测、形态分类及质量评判等的研究尚未见报道。随着染色方法的不断改进，精子形态学分析备受关注。本研究中，作者就马氏珠母贝的精子形态检测进行研究，旨在找到一种简单、有效、经济的染色方法来快速检测贝类精子的形态，客观、准确地评价精子的功能状态，为受精能力的预测、精子冷冻的研究等提供参考数据，这对于生产实践具有重要的意义。

1 材料与方法

1.1 材料

试验用马氏珠母贝于2009年11月取自湛江雷州，运回实验室后洗净暂养。

1.2 方法

1.2.1 精子的获得 挑选性腺发育成熟的鲜活雄贝，解剖后用吸管刺破性腺，吸取精液于50 mL小烧杯中，加入适量煮沸消毒过滤海水混匀。……