慢性环孢素肾病大鼠模型制作体会＊

谭州科，张子阳，罗 茜，唐 智，杨亦彬

(遵义医学院附属医院肾内科，贵州 遵义 563099)

长期使用环孢素A(CsA)导致的慢性环孢素肾病(CCN)是引起移植术后移植肾失功的重要原因之一，然而CsA仍是目前最重要的器官移植一线抗排斥药物［1］，因此探讨慢性环孢素肾病的发病机制并寻找有效的阻止或延缓慢性环孢素肾病的方法有重要意义。建立慢性环孢素肾病模型是进行干预实验的基础，本实验拟通过建立慢性环孢素肾病大鼠模型观察其可行性，并总结该模型制作体会，为进一步研究慢性环孢素肾病的发病机制及其防治积累有价值的模型制作资料。

1 材料与方法

1.1 主要试剂 环孢素溶液50 mL:5g(由杭州中美华东制药有限公司提供)，溶解于橄榄油，兔抗大鼠TGF－β，兔抗大鼠α－SMA一抗(美国Santa Cruz)，羊抗兔IgG(北京中杉生物技术公司)。

1.2 实验分组及方法 雄性SD(Spragye－Dawley)大鼠，体重200～220 g，由第三军医大学大坪医院实验动物中心提供，清洁级(合格证号SCXK(渝)20070003)。低盐饮食参考照 Rosen 等［2］介绍的配方委托第三军医大学实验动物中心配制，测定钠含量为0.046%(原子吸收火焰法测定)。低盐饮食饲养7 d后，随机分为4组:环孢素模型组(n=12):参照文献［3］将环孢素用橄榄油稀释成8 g/L，按 25 mg·kg－1·d－1，灌胃，每天 1 次。溶剂对照组(n=12):予橄榄油 2.5 mL·kg－1·d－1。低盐对照组(n=12):低盐饮食。正常对照组(n=6):正常饮食。前三组均自由摄取低盐饮食，饮用自来水，7d称一次体重，调整环孢素给药量。分别于第4、6周实验终点前置大鼠于代谢笼，收集24 h尿液检测尿蛋白;静脉采血用于血肌酐、药物浓度测定;肾组织置于10%甲醛浸泡，用于组织学和免疫组织化学检查。……