脱氧胞苷激酶对HeLa细胞放化疗敏感性的影响

梁 冰，刘晓冬，徐慧英，信 瑞，孔德娟，贺梦子，贾立立，徐 波，马淑梅

(吉林大学公共卫生学院 卫生部放射生物学重点实验室，吉林 长春 130021)

子宫颈癌是仅次于乳腺癌的全球第二种最常见的妇科恶性肿瘤，而且发展中国家所占发病比例极高(> 80%)[1]，严重危害妇女的健康与生命。目前，放疗作为宫颈癌治疗的常规手段，广泛地应用于临床，而化疗因其作用效果存在争议，应用范围较小。据统计约有80%的宫颈癌患者需要以放射治疗作为单独治疗或综合治疗，虽然早期患者放射治疗效果较好，但是中、晚期患者的治疗效果仍较差，主要原因是辐射敏感性不理想等问题。因此，如何提高肿瘤的放射敏感性，成为当前宫颈癌治疗的关键问题之一。近年来，随着分子生物学的发展，发现某些基因的表达在分子水平上影响着肿瘤细胞的放射敏感性。脱氧胞苷激酶(deoxycytidine kinase,DCK)是脱氧核苷酸生物合成补救途径中的关键酶，在维持正常的脱氧核苷库方面起着重要的生理学作用。大量研究[2-3]发现：电离辐射和其他基因毒性因子刺激可引起细胞DCK激酶活性增高而促进DNA损伤的修复。目前，有关RNA干扰技术沉默HeLa细胞DCK基因改变其放化疗敏感性的研究尚未见报道。本研究利用干扰技术特异性地阻断DCK 基因在宫颈癌细胞中的表达，观察其对人宫颈癌细胞药物敏感性及辐射敏感性的影响，为宫颈癌的基因治疗提供新的靶点和思路。

1 材料与方法

1.1 主要试剂与仪器实时定量PCR所需引物及RNAiso plus、SYBR Premix Ex Taq试剂盒(荧光为SYBR Green Ⅰ)等均购自大连宝生物公司。D……