分枝杆菌噬菌体D29与巨噬细胞的相互作用及其机制

张红梅，梁 梅，刘 平，乌亭亭，郭述良

(重庆医科大学附属第一医院呼吸内科，重庆400016)

目前结核疫情和耐药形势仍十分严峻，已有40多年没有突破性的抗结核药物问世，急需开发治疗结核病的新药物、新技术和新方法。由于噬菌体能够特异性裂解宿主菌，金黄色葡萄球菌噬菌体、铜绿假单胞菌噬菌体等多种噬菌体已用于临床试验。面对日趋严峻的结核疫情，分枝杆菌噬菌体D29因能特异性裂解结核菌而成为研究热点，国家“十一五”重大专项课题已经给予支持，该课题前期研究显示：分枝杆菌噬菌体D29不仅能裂解巨噬细胞外的结核菌，且能裂解巨噬细胞内的结核菌。但D29是如何进入巨噬细胞内，进入巨噬细胞后又是如何进入巨噬细胞内的结核菌内以及D29在巨噬细胞内结核菌内外分布的滴度变化是本文作者关注的问题，目前尚无相关文献报道。本研究通过探讨分枝杆菌噬菌体D29是否会影响巨噬细胞的免疫功能及D29被巨噬细胞吞噬后在结核菌内外的滴度变化，旨在为研究D29用于治疗结核病的机制及临床治疗剂量的确定提供参考。

1 材料与方法

1.1 菌株、动物、主要仪器和试剂

分枝杆菌噬菌体D29及耻垢分枝杆菌由本室培养，H37RV结核标准株来自重庆市肺科医院。耻垢分枝杆菌、H37RV结核标准株分别在改良罗氏培养基上37℃培养3～7 d和2～4周，分枝杆菌噬菌体D29的扩增和效价检测方法见参考文献[1-2]，纯化方法见参考文献[3]，4℃保存。7～8周龄SPF级BALB/C小鼠，购自重庆医科大学实验动物中心。……