脂质体法介导pIRES2-EGFP-hVEGF165转染人胎盘源间充质干细胞

王博蔚，高 尚，朱振威，刘春丽,朱 镇，刘志辉

(1.吉林大学第二医院妇产科，吉林 长春 130041；2.吉林大学口腔医院口腔修复科，吉林 长春 130021；

3.吉林大学口腔医院口腔颌面外科，吉林 长春 130021；4.江苏省镇江市口腔医院口腔修复科，江苏 镇江 212002)

血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是能诱导血管生成、增加血管通透性及维持血管功能的强效促血管形成因子，在创伤愈合过程中发挥重要作用[1-3]，将其运用于难愈性创伤的治疗是目前研究的焦点，VEGF家族有5种亚型，其中VEGF165是最为重要的表型。因为VEGF半衰期较短，在正常组织中约为30～45 min，在缺血部位能延长至6～8 h，这就要求有一个缓释系统以延长VEGF作用于创伤修复部位的时间。近年研究者[4-10]发现：骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs)及脂肪源间充质干细胞(adipose-derived stem cells，ADSCs)在创伤修复领域具有重要应用潜能，可以向创伤局部扩充归巢，向创伤修复细胞—内皮细胞及成纤维细胞定向分化或通过创造增强修复的微环境促进组织内源性细胞的再生，从而加速创伤愈合；干细胞同时也是基因治疗的良好载体细胞，可以携带目的基因到达靶区域发挥治疗作用。人胎盘源间充质干细胞(human placenta -derived mesenchymal stem cells，HPMSCs)是近几年逐渐受到关注的新的成体干细胞来源，本文作者前期研究[11-12]表明：HPMSCs在形态及生物学性状方面与BMSCs基本一致，在特定诱导条件下可以向内皮细胞定向分化，提示HPMSCs可以作为创伤修复的种子细胞。本研究拟构建VEGF的真核表达质粒pIRES2-EGFP-hVEGF165，并通过脂质体法将其转入HPMSCs中，探讨hVEGF165对HPMSCs增殖的影响及携带目的基因的HPMSCs的多向分化潜能，旨在为进一步应用VEGF转基因干细胞移植方法治疗难愈性创伤的研究奠定实验基础。……