六味地黄汤及其水提醇沉物对2型糖尿病肾阴虚证大鼠脂代谢的影响

肖子曾，邢 瑞，戴 冰，何泽云，周芳亮，刘红宇，黄开颜，杨赛男

（1湖南中医药大学 湖南 长沙 410007；2.湖南中医药大学第一附属医院 湖南 长沙 410007）

六味地黄丸滋补肝肾，滋阴养血，其治疗糖尿病具有良好的疗效，可以改善糖尿病发病过程中的葡萄糖代谢异常[1]，调节血脂[2]，能减慢糖尿病肾病病变的发展，具有保护糖尿病肾病患者肾脏的作用[3]。本实验旨在探明六味地黄汤干预2型糖尿病的作用机制及其药效物质基础，为其临床研究提供进一步实验依据。

1 材料与方法

1.1 一般材料

1.1.1 动物 30只清洁级健康雄性SD大鼠，体质量180～220 g，由湖南中医药大学动物实验中心提供，动物合格证号：SCXK(湘)2009-2004。

1.1.2 药物 六味地黄方：熟地黄24 g，山茱萸12 g，山药12 g，牡丹皮9 g，泽泻9 g，茯苓 9 g。药材由湖南中医药大学第一附属医院药剂科提供。

1.1.3 试剂 枸橼酸（批号: 100823），磷酸氢二钠（批号：101125），链脲佐菌素（STZ，Sigma，批号：S8050，纯度98%）购自Sigma公司，氢化可的松（批号：11021411，天津药业焦作有限公司），胰岛素（批号：1102229，江苏万邦生化医药股份有限公司），葡萄糖（批号：110302，成都金山化学试剂有限公司），环-磷酸腺苷（cAMP）酶联免疫试剂盒（批号：20111206）。

1.1.4 仪器 快速血糖仪及血糖试纸（美国罗氏公司）；ca-958d型半自动生化分析仪；WH-1型旋涡混匀器（上海沪西分析仪器厂）；旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）；TD4-Ⅱ型台式自动平衡离心机（长沙平凡仪表有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 六味地黄汤及水提醇沉物的制备 称取六味地黄方饮片10付，共750 g，加6倍量水，浸泡30 min，煎煮30 min，过滤，再加4倍量水，煎煮30 min，合并两次滤液，水浴浓缩成浓度为0.75 g/mL的六味地黄汤。取适量浓缩后的六味地黄汤，70%乙醇醇沉处理，静置24 h，真空抽滤，除去沉淀部分，醇溶上清液浓缩，共得水提醇沉物149.7 g（每1 g水提醇沉物相当于生药2.51 g）。……