高效液相色谱法测定湿毒清胶囊中黄芩苷的含量

天津市大港药检所（300270）董宪凤

湿毒清胶囊为常用复方制剂，是治疗皮肤瘙痒症的良药。由地黄、当归、丹参、黄芩、蝉蜕、苦参、白藓皮、甘草、土茯苓等9味中药材组成。为了更加有效地控制产品的质量，对处方黄芩中黄芩苷的含量，利用HPLC法进行含量测定，方法操作简便易行，具有分离好、灵敏度高、稳定性强等优点。

1 仪器与试药

岛津高效液相色谱仪 LC－2010AHT，岛津高效液相色谱仪工作站LC－Solution，Diamonsil C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；黄芩苷对照品（批号：110715-200514，中国药品生物制品检定所提供）；湿毒清胶囊（广西玉林制药有限责任公司生产，批号为261200、261016、261025）；甲醇和磷酸为色谱纯，水为纯化水。

附表1 回收率试验测定结果

附表2 湿毒清胶囊中黄芩苷的含量

2 方法和结果[1]

2.1 色谱条件[2][3][4]色谱柱为Diamonsil C18柱，流动相：甲醇-水-磷酸（52∶48∶0.2），流速为0.8ml/min，柱温30℃，检测波长为276nm，进样量10ul。

2.2 对照品溶液的制备及标准曲线的绘制精取黄芩苷对照品10.24mg置50ml棕色量瓶中，加50%甲醇溶解稀释至刻度，作为对照品溶液，精取1ml置10ml容量瓶中，加50%甲醇溶解稀释至刻度。进样量分别为6ul、8ul、10ul、12ul、14ul、16ul，以峰面积对进样量回归，结果黄芩苷在1.23～3.28ug范围内呈线性，回归方程：f（x）=1.1x+1.9×105，r=0.9999。

2.3 样品溶液的制备 取本品20片，除去糖衣，精密称定，研细，混匀，精取约0.5g，精密加入50%甲醇50ml，称定重量，超声处理30min，放冷，称定重量，用50%甲醇补足重量，摇匀，滤过，取续滤液备用。

2.4 精密度试验 精密吸取浓度为20ug/ml的对照品溶液，按上述色谱条件进样量为10μL，连续进样5次，测得黄芩苷峰面积的平均值为1931354，RSD=1.1%。

2.5 重现性试验 取同批号（261200）的样品0.5g，按样品配制方法制备5份，进样量为10μL测定黄芩苷的含量，RSD=1.4%（n=5）。……