三七及屏边三七花粉不同贮藏条件生活力测定

孙玉琴，黄天卫，杨 莉，韦美丽，王朝梁，陈中坚

（1.文山学院 三七研究院，云南 文山 663000；2.文山华信三七股份有限公司，云南 文山 663000）

花粉是种子植物的雄配子体，在有性繁殖中发挥着重要作用。采集的花粉和贮存的花粉，在使用之前必须作生活力的鉴定，以估价花粉是否有授精能力。在农业和林业的常规育种工作中，为了进行人工辅助授粉和杂交授粉，通常需要早期采集和储藏花粉，尤其是在杂交育种工作中，为解决亲本花期不一致和远距离杂交的问题，更需要保存生活的花粉［1］。

三七［Panax notoginseng（Burk.）F.H.Chen］及屏边三七（P.stipuleanatus）属五加科人参属植物，三七由于长期的人工栽培，病虫害比较严重［2］，屏边三七为三七的近源野生种，具有较强的抗病性。但人工栽培三七与屏边三七花期不遇，为探寻是否可以利用杂交育种手段选育三七抗病新品种，为三七的育种工作提供一条新途径，笔者对不同贮藏条件下二者的花粉生活力进行测定，以便了解二者的花粉贮藏寿命。

1 材料与方法

1.1 材料

试验材料采自文山学院三七研究院砚山试验场内种植的二年生三七，三年生三七及种质资源圃内的多年生屏边三七的花粉，采样后分别保存在普通冰箱的4 ℃保鲜层及-20 ℃冰冻层中。

1.2 方法

1.2.1 染色液的配制

花粉测定采用噻唑蓝（MTT）染色法，称取0.1 g MTT，溶解于10 mL配置好的5%的蔗糖溶液中，摇匀置于冰箱中避光保存。

1.2.2 染色测定操作过程

（1）取少数花粉置于载玻片上，加1～2滴MTT溶液，盖上盖玻片

（2）将制片在室温下放置15 min，然后在低倍镜下观察。……